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冬虫夏草品种的真伪问题 甘草是一种传统的稀有中药。它具有益肺益肾、止血散粘液的作用。主要用于肾衰竭、阳痿、腰膝痛、久咳、哮喘和咳嗽。现代药理研究结果显示, 冬虫夏草具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗疲劳和降血糖等多种药理作用。近年来, 由于乱采滥挖, 生态环境受损、菌源枯竭、冬虫夏草资源濒临灭绝。有学者调查研究表明, 青海、西藏、四川和云南等省区大部分地区虫草的产量不到25年前的10%, 甚至有些原来资源分布密集区近年没有发现虫草生长。由于冬虫夏草确切的临床功效和资源的稀缺, 导致冬虫夏草的价格不断上涨, 堪比黄金, 从20世纪70年代的36元·kg-1, 到现在的20万元·kg-1左右, 最贵已达80万元·kg-1。由于现阶段冬虫夏草价格的昂贵和资源的稀缺, 市场上虫草产品以次充好、以假乱真的现象大量存在, 这对其临床疗效和用药安全造成了严重的影响, 因此冬虫夏草的真伪鉴别研究对保证其用药的安全性和有效性尤为重要。前期已有文献对冬虫夏草鉴别方法进行了概述, 本文在已有文献综述的基础上对国内外近10年来冬虫夏草真伪鉴别方法进行了系统的归纳总结, 为广大消费者和科研工作者提供科学参考。根据中药鉴定学方法分类, 冬虫夏草鉴别方法可以分为性状鉴别、显微鉴别、分子生物学鉴别和化学鉴别, 现分述如下。 1 鉴别法上的特征 冬虫夏草性状鉴别一般是从样品的虫体色泽、眼睛颜色、环纹数以及“一宽三狭的结构”、腹足和子座着生位置、子座表面结构、长短、数量以及样品气味等特征进行观察比较。本文根据文献记载[5,6,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19], 分析总结出了冬虫夏草性状鉴别的以下特征: (1) 虫体的体表呈深黄色至黄棕色, 头部呈红棕色。 (2) 虫体环纹20~30个, 1~7腹节存在“一宽三窄”结构。足8对, 中部4对较明显。 (3) 虫体质脆易断, 断面黄白色, 中间会存在一个黑色“V”字或黑色圆点。 (4) 子座表面深棕色至棕褐色, 从寄主顶部正上方发出, 呈细长圆柱形, 长4~7cm, 直径约0.3~0.8cm。 (5) 气微腥, 味微苦。上部稍膨大, 有细纵皱纹, 质地柔软。以上冬虫夏草鉴别点能够对冬虫夏草和其常见的伪品 (亚香棒虫草、蝉花、蛹虫草、分枝虫草、新疆虫草、凉山虫草、香棒虫草、珊瑚虫草) 进行有效区分, 但是很多时候对冬虫夏草了解不深入的大众消费者来说, 有些高度相似的伪品在形态鉴别方面存在一定的困难, 更有造假者将混淆品或者伪品进行加工, 使它们和真品冬虫夏草形态更为接近, 这无形中又增加了鉴别的难度。故一般需要结合其他分析鉴定技术进行鉴别。 2 冬春子的鉴定 显微鉴别是中药鉴定领域很常用的技术, 冬虫夏草的显微鉴别一般是利用光学或电子显微镜对样品体壁刚毛、绒毛、环纹、腹足、子囊壳等结构的显微/亚显微特征进行观察和比较。 冬虫夏草显微结构:冬虫夏草切片后显微观察, 与其他伪虫草样品在体壁细胞的表面观、侧面观、体表刚毛、子囊壳着生位置等显微结构上也存在显著的差异, 如冬虫夏草体壁细胞表面观颜色呈淡黄至黄色, 侧面观可见丛生刺状毛;体表刚毛呈黄橙色, 眼睫毛状, 不规则排列, 顶端钝圆, 基部渐阔, 有些上部略呈钩状;子囊壳半埋生, 可以根据这些特征对冬虫夏草及其伪品进行鉴别。 粉末显微结构:虫草纯粉片、虫草胶囊等粉末制品充斥市场, 不法商贩为了获取巨大利润向虫草粉末制品中添加含淀粉的植物粉末、不明虫卵粉末、伪虫草粉末等, 以此获高额利润。粉末制品肉眼无法鉴别, 显微镜检能够辨认细小的冬虫夏草粉末和杂质。冬虫夏草虫体体壁粉末碎片表面具小刺毛或圆形残痕, 团块状物质色泽呈黄色;毛片碎片呈淡黄色点状, 具环状残留毛窝;子囊壳呈卵圆形、半埋生的着生方式、边缘色褐、子囊直径10μm左右等特征均可以作为冬虫夏草粉末的鉴别特征, 如果未发现粉末碎片呈现上述特征或掺杂有其他特征碎片的, 比如子囊全埋生或者毛片碎片无淡黄色点状等, 则为伪品或掺伪品。通过番红-固绿染色、斯氏碘染色等染色方法也可以有效地对冬虫夏草粉末进行鉴别, 如果每片均能清晰观察到冬虫夏草的特有结构, 且没有碘液染色下的明显蓝色斑点, 没有观测到明显的植物组织, 即可判断为纯冬虫夏草粉, 如果有蓝色斑点则表明有淀粉类物质混入。 超微结构:冬虫夏草分离出的杂菌菌丝和中国被毛孢的超微结构中都存在一个瓶形小梗的结构, 但是前者瓶形小梗呈圆形或椭圆形, 后者呈钻形;另外, 瓶形小梗着生方式也不同, 前者为单生或者顶生而后者为单生或轮生。根据以上结构特点可以区分冬虫夏草中分离的杂菌和中国被毛孢菌丝体。Noriko Kinjo等对冬虫夏草子囊超微结构进行了研究, 干虫草标本子囊壳呈球形或花瓶形、密集排列, 拟薄壁组织厚, 子囊柱形、基部窄;鲜虫草标本子