基因工程药物的研究开发及其产业化.pptx

第十章?????? 基因工程药物的研究开发及其产业化一、基因制药的研究开发状况二、基因工程药物研究开发的程序 二、基因工程药物研究开发的程序（一）开发原则 （二）基因工程药物的基本操作 （三）基因工程生物制品研究、开发、生产过程 （二）基因工程药物的基本操作 1.获得基因(即基因来源) （1）人工合成基因 （2）利用cDNA文库（3）从基因组DNA文库中分离基因 （4）基因的改造 如图10-3 2.基因载体的制备 如表10-6、表10-73.基因表达 （1）细菌表达系统 （2）酵母表达系统 （3）昆虫细胞多角体病毒表达系统 （4）哺乳动物细胞表达系统 如表10-8 4.产品纯化 5.基因工程药物质量控制 6．基因工程药物质量控制要点 （三）基因工程生物制品研究、开发、生产过程(1)实验研究：基因克隆重组、表达、分离纯化、质控(2)小量试制：初步选定工艺流程，确定质控标准，验证工艺可行性。(3)中间试制：工艺放大，进一步验证技术路线可行性和质量符合标准。至少连续试制三批，证明其一致。形成生产规程草案及国家鉴定合格；(4)申报审评和进行临床研究；(5)提供临床研究资料(Ⅰ，Ⅱ期)申请试生产及Ⅲ期临床研究；(6)总结试生产全部资料，申请正式生产，获准字生产文号。 基因制药的研究开发状况主要国家基因制药产业化概况，如表10-1美国基因制药状况：2001年批准27种，369种上临床，如表10-2、表10-3。历年美国批准基因工程药物有116个，近六年为前13年的三倍，近四年批准的药物为前15年之和，2000年批准32个相当于当初11年总和，说明发展迅速如图10-1。日本基因制药产业动态如表10-4我国基因制药产业化动态如表 10-5基因制药的应用范围和开发周期如图10-2 基因工程药物质量控制产品鉴别纯度分析（蛋白质含量、杂质来源和分析）活性测定安全性评价稳定性考察产品的一致性 载体 (Vector) 宿主(Host) 质粒 (Plasmids) 细菌 (Bacteria) 植物 (Plants) 酵母 (Yeats) 噬菌体 (Phages) 细菌 (Bacteria) 病毒 (Viruses) 动物细胞 (Animal Cells) ? 特 点：载 体逆转录病毒 腺病毒 HSV细小病毒 sEBV核酸类型 RNA DNA DNA DNA DNA基因组大小(Kb) 3.5—9.0 36 152 ～5 172外源基因插入 ＜9 2－7 30 4 17容量(Kb)?????重组病毒滴变中高高高—靶细胞状态必需分裂静止也可静止也可静止也可—宿主范围较宽宽宽宽宽基因整合是否可是否特点可进行人体试验 可通过呼吸道进行基因转移 可将基因导入神经细胞 基因定位整和 游离质粒 比较指标 表 达 系 统大肠杆菌酵 母 菌哺乳动物细胞昆虫细胞1．外源基因表达水平高比较高不高不高(家蚕除外)2．培养条件易易难较难3．表达产物的形式多数不能分泌，胞内形成包涵体多数能分泌，少数在胞内形成包涵体，有时产物不均一一般都能分泌一般都能分泌4．表达产物的糖基化不能糖基化能糖基化，但糖基化程度与天然产物有差别糖基化好，近似天然产物能糖基化，但糖基化程度与天然产物有差别5．产物纯化工艺细胞破壁容易，多数产物需“复性”，工艺较复杂胞内表达破壁困难；分泌物纯化工艺简单纯化简单纯化较简单(家蚕除外)6．生产成本高，主要化费在纯化方面低高，主要花费在培养条件方面高，主要花费在培养条件方面(家蚕除外)7．稳定性差较好好较好8．难点复性破壁培养培养 国家 发展策略 投入资金 临床试验 上市品种 产值 美 国 支持基础，创新，主导 领先水平100亿US$/年350[2001（1-19）] 110[2001（1-6）27]200亿US$/年 日本 合作，实用化，信息化两千亿日