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摘要
基因克隆技术和组装技术是重要的分子生物学工具。基因工程有五项基本操作:目的基因的分离,酶切,连接,转化,菌落的筛选。在重组连接的过程中,大片段组装基因和小片段组装基因中,载体和片段的加样量使组装效率产生差异性。本文通过设计多个载体和片段的加样量,找到了对于大分子基因和小分子基因的最适反应体系,大分子组装片段载体各0.1pmol最佳,为节省载体可片段0.1 pmol ,载体0.03pmol。小分子(sGRNA)组装加样
0.1:0.1和0.1:0.03(片段:载体)pmol效率最高。通过该研究大大提高了组装效率以及克隆的阳性率。
关键词:基因克隆,重组连接,片段,载体,组装效率
第一
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