SNT 2329-2009化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊试验.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2329—2009化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验Cosmetics ocular irritant and corrosive HET-CAM test2009-07-07 发布2010-01-16 实施中华人民共和国发布数码防伪国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验SN/T 2329—-2009*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www.spc.话国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×1230　1/16　‘印张0.75字数 16 千字2009年11月第一次印刷2009年11月第一版印数 1--2 000书号：155066·2-19941 SN/T 2329—2009言前本标准附录 A 和附录 B均为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局。本标准主要起草人：潘芳、程树军、许崇辉、焦红、温巧玲、史喜菊、刘慧智。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验1范围本标准规定了化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚尿囊膜试验的基本原理、试验准备、试验方法、结果和报告。本标准适用于化妆品、化妆品料/化学品眼刺激性/腐蚀性作用的筛选和检测。本标准可作为毒性试验的一部分,结合其他替代试验和动物试验用于受试物眼刺激性整体评价。本标准也可作为制药、农业和工业化学物质和污染物毒性测定的参考方法。2　术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1眼刺激性eye irritation眼前部直接接触受试物后引趋的眼及其周围粘膜可逆性炎性变化2. 2眼腐蚀性eye corrosion眼前部直接接触受试物后引起的眼及其周围粘膜不可逆性纽织损伤。2.3绒毛尿囊膜chorioallantoic/membrahe,胚龄 4 d～5 d时，由绒毛膜体壁中胚层和康囊膜脏层中胚层融合而成,其组织学结构有三层。2. 4出血hemorrhage血液从 CAM膜血管内流出血管外可以表现为血管外出现点状出血或絮状的弥漫性出血等多种形式。2. 5凝血 coagulation血管内和血管外蛋白的变性,表现为血管内血流变慢或血栓形成，血管呈现棕黑色，血管外出现混浊和不透明。2. 6血管融解 blood vessel lysisCAM膜上小血管壁破裂,小血管融解消失。3基本原理鸡胚绒毛尿囊膜试验是一种较早被采用的眼刺激性体外评估方法,绒毛尿囊膜(CAM)是一个呼吸性膜,包围在鸡胚周围。本试验利用孵化的鸡胚中期绒毛尿囊膜血管系统完整、清晰和透明的特点,将一定量受试物直接与鸡胚尿囊膜接触,作用一段时间之后观察绒毛尿囊膜毒性效应指标(如:出血、凝血和血管融解)的变化，这些指标反映血管及血管网的形态结构、颜色和通透性的变化，以及反映绒毛尿囊膜蛋白质变性等现象及其受损程度,然后组合得到一个评分,用于评估受试物的眼刺激性。本试验的目1 SN/T 2329--2009的是测试受试物引起鸡胚绒毛尿囊膜毒性变化的能力，标准描述了评价被评估物质潜在的眼刺激性的要素和过程。4试验准备4.1 鸡胚4.1.1　品系和来源白莱杭鸡（White Leghorn chicken）或星杂288（Shaver Starcross）受精鸡胚，也可选用白洛克(White Plymouth Rock)、麻黄(spotted-brown chickens)或岭南黄鸡(Lingnan Yellow chicken)等品种受精鸡胚，应当选用SPF鸡胚，鸡胚质量符合相关标准的要求，供应商应具有农业部门认可的《兽药生产、检验用SPF鸡(蛋)定点生产企业》资格。4.1.2运输与贴存购买7日龄以内的鸡胚,气室朝上贮存于蛋架上运输。应在不影响胚胎活性或发育的情况下转移或运输鸡胚，避免对鸡胚摇动、不必要的倾斜、敲打以及其他机械性刺激。4.1.3规格要求鸡胚应新鲜、干净、完好，质量 50g～60g。孵化至 9日龄时，应照蛋检查，弃去未受精、无活性或有缺陷的鸡胚，严重畸形、破壳或薄壳鸡胚也不能使用。4.1.4孵化条件室温20℃～25℃,相对湿度45%～70%。孵化温度37.5℃±0.5℃,相对湿度55%～70%,转盘频率 3次/h～6 次/h。9 日龄的鸡胚孵化时不必旋转。4.1.5CAM制备9日龄鸡胚进行照蛋检查，在蛋壳表面标记气室位置；用牙科锯齿弯镊剥去带标记的蛋壳部分，暴露白色蛋膜，应小心操作不破坏蛋膜完整性。用吸管滴加几mL 0.9%氯化钠（NaC1)溶液使蛋膜湿润，此