SN 1366-2004葡萄根瘤蚜的检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1366-2004葡萄根瘤蚜的检疫鉴定方法Methods for quarantine and identification ofgrape phylloxera Viteus vitifolii (Fitch)2004-12-01实施2004-06-01发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局一数码防伪， SN/T 1366--2004前言本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王寿民、郑雪明、王振忠、鞠洪绶。本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T萄根瘤蚜的检疫鉴定方法1 范围本标准规定了葡萄根瘤蚜的检疫和鉴定方法，本标准适用于葡萄苗木、插条传带的葡萄根瘤蚜的检疫鉴定。2 原理2.1葡萄根瘤蚜Viteus vitifolii(Fitch）属同翅目（Homoptera）、胸喙亚目（Sternorrhycha）、球蚜总科(Adelgoidea)、根瘤蚜科(Phylloxeridae)。2.2单食性，主要为害葡萄的根部。须根被害后肿胀形成菱角形或鸟头状根瘤，侧根和大根被害后形成关节形肿瘤;部分葡萄品种的叶部受害后在叶背面形成虫瘿。此虫主要随带根的葡萄苗木或插条的调运而传播。2.3该虫的寄主、形态特征、传播途径、危害症状是本标准鉴定方法的依据。3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1根瘤 root nodule因蚜虫刺吸植物根部而导致植物根组织形成的瘤状物称为根瘤。3.2虫瘘gall因昆虫或螨类的取食刺激引起植物组织局部增生面形成的瘤状物。3.3喙 proboscis头部前方延伸的部分。3. 4原生感觉圈 primary sensorium蚜虫触角第一节上的感觉孔。3.5次生感觉圈 secondary sensorial蚜虫触角上除了第一节外，其他各触角节上的感觉孔。3. 6无翅成蚜 wingless adult aphid无翅的孤雌蚜虫。3.7若虫nymph渐变态中幼体与成虫在体型、习性及栖息环境等方面都很相似，但幼体的翅发育还不完全，成为翅芽,生殖器官也未发育成熟，特称为若虫。1 SN/T 1366—20043.8中胸盾片mesoscutum有翅蚜中胸前端的三角形骨片。3.9尾片cauda蚜虫腹末生有一个圆锥形或乳头状突起。3. 10腹管cornicles蚜虫科多数种类在第六或第七腹节两侧前方生有一对管状突起。4仪器、用具及试剂4.1体视解剖镜、生物显微镜。4.2手持放大镜、小镊子、解剖针、毛笔、剪刀、小玻瓶、指形管、标签纸、橡皮塞、脱脂棉、载玻片、盖玻片。4.375%乙醇，用于蚜虫的采集及保存。4.45%氢氧化钾、50%乙醇、95%乙醇、蒸馏水、品红、无水乙醇和二甲苯混合液（1：1）、丁香油、中性树胶，用于玻片标本的制作。5现场检疫5.1检查5.1.1检查葡萄根部(尤其须根），有无被害后形成的菱形（或鸟头状)根瘤，侧根和大根处有无关节形肿瘤。5.1.2检查叶片上有无虫瘦。5.1.3检查运输工具、包装物及四周区域。5.2将获得的各虫态蚜虫放入盛有75%乙醇的小玻瓶或指形管中保存，在实验室根据鉴别特征进行结果判定。6室内鉴定6.1将现场检疫所得的乙醇浸泡标本，换上棉花塞，放在开水杯中水浴一次至两次，凉后换橡皮塞保存。用体视解剖镜观察各虫态浸液标本的形态特征。6.2玻片制作6.2.1用o号昆虫针在蚜虫腹部刺穿一孔至二孔，在5%氢氧化钾溶液水浴加热3min～10 min，清除蚜虫腹内残余内容物，用蒸馏水清洗一次至二次后，依次用50%乙醇(5min）、70%乙醇(5min）、95%乙醇(2min)脱水，然后用1%的（以95%乙醇作为溶剂）品红溶液染色，再用95%乙醇清洗多余的颜色，移人无水乙醇和二甲苯混合液(1：1)中，用小毛笔除去污物。6.2.2在载玻片土滴数滴丁香油，放人标本，整姿，用吸水纸吸干丁香油，滴人中性树胶数滴，盖好盖玻片，置人40℃～50℃恒温箱内烘烤二至三天。6.3在生物显微镜下观察玻片标本的形态特征。7主要鉴定特征7.1根瘤蚜科的鉴定特征无翅蚜和若蚜触角三节，有一个圆形原生感觉圈。眼有三小眼面。头部与胸部之和长于腹部。尾2 SN/T 1366—2004片半月形,无腹管。罕见有产卵器。有翅蚜触角三节,有两个纵长次生感觉圈。前翅有三脉：一根中脉和两根共柄的肘脉，后翅无脉。静止时翅平叠于背面。中胸盾片不分为两片。性蚜无喙，不活泼。孤雌蚜与性蚜均卵生。7.2葡萄根瘤蚜的主要鉴定特征7.2.1根瘤型无翅成蚜体背各节具灰黑色瘤，头部四个，各胸节六个,各腹节四个。胸、腹各节背面各具一横形深色大瘤状突起。触角第三节最长，其端部有一个圆形或椭圆形感觉圈，末端有刺毛三