SNT 2291-2009进出口化妆品中氢溴酸右美沙芬的测定 液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2291—2009进出口化妆品中氢溴酸右美沙芬的测定液相色谱法Determination of dextromethorphan hydromide incosmetics for import and export-Liquid chromatography method2009-09-01实施2009-02-20 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2291-2009前言本标准的附录 A 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：吴延晖、许泓、林安清、肖亚兵、古珑、张曼、何佳、张骏。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2291-2009进出口化妆品中氢溴酸右美沙芬的测定液相色谱法1范围本标准规定了进出口化妆品中氢溴酸右美沙芬的液相色谱检测方法本标准适用于化妆品中氢溴酸右美沙芬的检测。2原理用甲醇提取试样中的氢溴酸右美沙芬，提取液经离心过滤后，用液相色谱-荧光检测器测定，外标法定量。3试剂和材料3.1乙腈：色谱纯。3.2甲醇：色谱纯。3.3三乙胺：色谱纯3.4冰乙酸：色谱纯3.53%乙酸溶液：量取30mL冰乙酸，用水定容到1L,用三乙胺调节pH=4.3。3.6氢溴酸右美沙芬标准物质：纯度≥99%。3.7氢溴酸右美沙芬标准储备溶液：准确称取适量氢溴酸右美沙芬标准物质（精确到 0.1mg）,以甲醇配制成浓度为1000 μg/mL的标准储备溶液。3.8标准工作溶液：根据标准的灵敏度和仪器线性范围，用甲醇稀释成适当浓度的标准工作液。3.90.22 μm有机相滤膜。3.10刻度具塞离心管：15mL。4仪器4.1高效液相色谱仪：配有荧光检测器。4. 2 分析天平:感量 0. 1 mg。4. 3超声波水浴。4.4冷冻离心机（转速大于3500r/min）。4.5 冰箱（-18 ℃）。5测定步骤5.1试样处理称取试样约 1.0 g(精确到 0.01 g),于 15 mL具塞刻度离心管中,加人甲醇 8 mL,用力振摇使基质均匀分散后，将溶液定容至10mL,在超声波水浴内超声20 min，混匀，在冰箱冷冻室（一18℃或更低温度)放置 10 min后，于 3500 r/min下冷冻离心 5 min,将样品放至室温，取上清液经 0.22 μm有机滤膜过滤，滤液供液相色谱测定。5.2测定5. 2. 1液相色谱条件荧光检测器：激发波长280nm，发射波长310 nm。5.2. 1. 2 色谱柱:Phenomenex 5 μm C:,250 mmX4. 6 mm,5 μm。 SN/T 2291--200流动相：乙腈+3%乙酸溶液（34+66）。5. 2. 1. 4 流速:1. 0 mL/min。5. 2. 1. 5 柱温:室温。5. 2. 1. 6 进样量:20 μL。5. 2. 2色谱测定移取氢溴酸右美沙芬标准储备溶液配制成0.025 μg/mL、0.05 μg/mL、0.5 μg/mL、1. 0 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL标准工作溶液。按色谱条件(5.2.1)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。在上述仪器条件下，氢溴酸右美沙芬的保留时间约为5.4 min。标准溶液色谱图参见附录图A.1。试样溶液(5.1)注人液相色谱仪，按色谱条件(5.2.1)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积。氢溴酸右美沙芬含量高的试样可取适量用甲醇稀释到线性范围内进行测定。5. 3 空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。6 结果计算根据标准曲线按式（1)计算：000CXV......(1)1000m式中：X-化妆品中氢溴酸右美沙芬的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；从标准工作曲线上查出的试样溶液中氢溴酸右美沙芬的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）；V-试样定容体积，单位为毫升（mL）；试样的质量，单位为克（g）。m-计算结果保留两位小数，计算结果需扣除空白7测定低限及回收率7. 1 测定低限本方法对氢溴酸右美沙芬的测定低限为0.5mg/kg。7. 2 回收率氢溴酸右美沙芬添加浓度及霜剂、水剂的回收率数据见表1表1氢溴酸右美沙芬添加浓度及霜剂、水剂的回收率试样类型添加浓度/（mg/kg）回收率范围/%0. 593.8~102.2霜剂类1098.7~104.510099.5~100.60. 592.0~102.6水剂类10 96.2~100.710093.3~99.22 SN/T2291-2009附录A（资料性附录）标准品色谱图LU160140120100806040/min氢溴酸右美沙芬（5.38min）图A.1氢溴酸右美沙芬