SNT 2497.5-2010进出口危险化学品安全试验方法 第5部分：睾丸细胞UDS试验.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2497.5-2010进出口危险化学品安全试验方法第5部分：睾丸细胞UDS试验Test method of import and export dangerous chemicals-Part 5: Unscheduled DNA synthesis (UDS) test with testicle cells2010-03-02发布2010-09~16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口危险化学品安全试验方法第5部分：睾丸细胞UDS试验SN/T 2497. 5--2010*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×12301/16　印张 0.5字数 10 千字2010年5月第版2010年5月第一次印刷印数 1—1 600书号：155066·2-20925 SN/T 2497.5-2010前言SN/T2497《进出口危险化学品安全试验方法》系列标准共分为29部分：第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验；第2部分：空斑形成细胞(PFC)试验；第3部分：大型遥繁殖试验；第4部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验；-第5部分：睾丸细胞UDS试验；第6部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验；第7部分：小鼠耳肿胀试验；第8部分：胭窝淋巴结试验；-第9部分：血清溶血素测定试验；第10部分：T淋巴细胞增殖功能测定试验；-第11部分：种系突变试验;第12部分：单细胞凝胶电泳分析试验；第13部分：荧光原位杂交试验；第14部分：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验；第15部分：PCR-SSCP实验；第16部分：Western-Blot实验；第17部分：哺乳动物行为毒理学试验；第18部分：DNA加合物的检测方法；第 19 部分:Northern Blot 实验；第20部分：Bradford法测定蛋白质含量；-第21部分：琼脂糖凝胶电泳试验；第22部分:DNA的 Tm 值测定方法;第23部分：细胞器的分离实验方法；第24部分：细胞免疫功能体外检测方法；第25部分：体液免疫功能试验；第26部分：巨噬细胞功能试验；第27部分：流式细胞术检测调亡；第28部分：穿梭质粒在突变检验中的应用；第29部分：生化需氧量(BOD)测定。本部分为SN/T2497的第5部分。本部分修改采用经济合作与发展组织(OECD)化学品测试指南NO.486(1997)《体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS)试验》，其有关技术内容与上述方法完全一致，在标准文本格式上按GB/T1.1—2000做了编辑性修改。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国湖南出人境检验检疫局。本部分主要起草人：李学洋、王利兵、陈庆俊、于艳军、赵琢、周磊。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。I SN/T 2497.5-2010进出口危险化学品安全试验方法第5部分：睾丸细胞UDS试验1范围SN/T 2497的本部分规定了进出口危险化学品的睾丸细胞UDS试验的术语和定义、试验原理、试验程序和试验结果。本部分适用于进出口危险化学品诱发动物睾丸细胞DNA损伤和修复的检测。2术语和定义下列术语和定义适用于本部分。2. 1正修复的细胞　cells in repair净核银粒(NNG)高于本试验室历史性阴性对照值的细胞。2. 2净核银粒net nuclear grains,NNG在放射自显影UDS试验中细胞内 UDS活性的定量测定，计算为核银粒数(NC)减去等于核面积的细胞质内银粒平均数(CG），即 NNG:NC一CG。由各细胞计算 NNG数,再将一个培养物或平行培养物中的细胞 NNG汇总。2. 3程序外 DNA 合成unscheduled DNA synthesis,UDS在切除含有由化学物质或物理因素引起损害的一段 DNA后，进行的 DNA修复合成。3原理睾丸细胞UDS试验是利用哺乳动物作指示生物的体内体细胞遗传毒理学试验，遗传学终点为原发性DNA损伤。由于本试验检测整个基因组，敏感度较高，对本试验提供致突变活性的信息缺乏特异性可能有所补偿。哺乳动物睾丸细胞UDS试验表明，由化学物质或物理因素诱发DNA损伤区经链切除后的DNA修复合成。本试验通常用放射自显影检测3 H-TdR(胸腺嘧啶脱氧核苷)掺人睾丸细胞DNA。与液闪计数法比较，放射自显影法对S期细胞的干扰不敏感。4试验方法4.1准备4.1.1动物选择应该利用常用品系的健康刚成年动物。首选大鼠，也可选用其他适当的哺乳动物。在试验开始时，动物体重差异应不超过每种