SN_T 4504-2016出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4504—2016出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of clobetasol, beclomethasone and clobetasolpropionate in cosmetics--HPLC-MS/MS method2016-06-28 发布2017-02-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4504-20.16本标准按照GB/T·1:1一2009给出的规则起草请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：白桦、李海玉、张庆、马强、孟宪双、王婉、郭项雨、王志娟 SN/T 4504—2016出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的测定液相色谱-质谱/质谱法范围本标准规定了水剂、膏霜类出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的液相色谱-质谱/质谱检验方法。本标准适用于水剂、膏霜类出口化妆品中氯倍他索、倍氯米松、氯倍他索丙酸酯的检验。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理直接称取水剂膏霜类化妆品，用甲醇溶解，涡旋混匀，然后超声提取激素类药物，离心取上清液，经固相萃取柱净化，用反相高效液相色谱串联质谱测定，外标法定量。试剂和材料N除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.1乙腈:色谱纯。4.2甲醇:色谱纯。4.3甲酸:分析纯。4.4氯倍他索标准物质：C2H2:CiFO4，CAS号25122-41-2,纯度≥98%。4.5倍氯米松标准物质：C22HzC1Os，CAS号4419-39-0,纯度98%。4.6氯倍他索丙酸酯标准物质：C25H32CIFOs，CAS号25122-46-7,纯度99%。4.7标准储备液：分别准确称标准物质氯倍他索（4.4）、倍氯米松（4.5）、氯倍他索丙酸酯（4.6）各50mg（精确到0.1 mg）于50 mL棕色容量瓶中，分别用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1000 mg/L的标准单标储备溶液，于4℃保存。4.8标准混合工作溶液：分别取标准储备液（4.7)1mL混合，用甲醇定容于100mL容量瓶，制成浓度10mg/L的标准混合储备液，于 4℃保存，临用时用初始流动相溶液稀释成 100 ng/mL、50 ng/mL、20 ng/mL、10 ng/mL、5 ng/mL、2 ng/mL、1 ng/mL等系列浓度的标准混合工作溶液，用于制作标准曲线。4.9Oasis HLB 固相萃取柱或相当者:60 mg,3 mL。4.10微孔滤膜：有机膜;孔径0.2μm。 SN/T ·4504--20165仪器和设备5.1高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI源）5.2分析天平,感量为0.001g和0.1mg。5.3超声波清洗器。5.4离心机,10 000 r/min。5.5涡旋混合器。5.6固相萃取装置。5.7氮吹仪。6测定步骤6.1样品处理6.1.1提取称取化妆品试样0.5g（精确到0.001g），置于10mL具塞离心管中，准确加人5mL甲醇，涡旋分散溶解，充分混匀，超声提取20min，低温10000r/min离心10min，转出上清液于50mL锥形瓶中，加人20 mL超纯水，混匀,直接上固相萃取小柱净化。6.1.2　净化将 HLB固相萃取柱置于固相萃取装置上,小柱预先依次用5mL甲醇，10mL水活化，将待净化的样品清液（6.1.1)全部流经柱子（有的样品过滤的特别慢，需要加压或抽滤），待样品溶液完全流尽后，用5mL30%的甲醇水清洗锥形瓶，并淋洗固相萃取柱，淋洗完后，用5mL甲醇缓慢洗脱HLB柱，收集洗脱液于 10 mL比色管中，最后真空抽滤，吸出小柱中的残留液，然后加入5mL高纯水，混合，经 0.2μm微孔滤膜过滤后待上机。6.2测定6.2.1液相色谱条件a)色谱柱:XBridge Ci:柱:150 mmX2.1 mm,粒径 3.5 μm,或相当者;b)柱温:30℃;c)进样体积：5μL;d)液相色谱流动相及参考分离条件见表1。表1 液相色谱流动相及参考分离条件时间/min流速/(mL/min)乙腈/%含0.1%甲酸的水溶液/%0.00.340601.50.3505.00.370305.1,0.390107.00.39010 SN/T 4504—2016表1 (续)乙腈/%含0.1%甲酸的水溶液/%时间