SN_T 4532.2-2016商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法二.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4532.2—2016商品化试剂盒检测方法方法二β-内酰胺类Commercial kit method-Beta-lactams-Test method I2017-02-01实施2016-06-28 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类方法二SN/T 4532.2 ---2016*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×12301/16印张 0.5字数10 千字2017年2月第一版2017年2月第一次印刷印数 1—1 100*书号：155066·2-31178 SN/T 4532.2--2016前言本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类》的第 2部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、深圳市检验检疫科学研究院、合肥工业大学、内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司、江苏农牧科技职业学院。本部分主要起草人：薛峰、肖锋、陈沛金、刘莉、陈伟、朱海、蒋原、蔡宝亮、李梅、曾德新、余超挺。1 SN/T 4532.2-2016商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类方法二1范围SN/T 4532的本部分规定了纯牛奶中β-内酰胺类、三聚氰胺和四环素类残留量的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中β-内酰胺类（含头孢氨）、三聚氰胺和四环素类残留筛选检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量定性判定。4试剂与材料4.1β-内酰胺类（含头孢氨苄）、三聚氰胺和四环素类四联检测试剂盒本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录 A。商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下：a）β-内酰胺类（含头孢氨苄）、三聚氰胺和四环素类四联检测试纸条;；b）微孔试剂（胶体金标记的β-内酰胺类抗体、主要成分为胶体金标记的三聚氰胺抗体、胶体金标记的头孢氨苄抗体和胶体金标记的四环素类抗体）。4.2试剂三聚氰胺、β-内酰胺类和四环素类对照品。5仪器设备5.1温育器：40℃士2℃。5.2移液器:200 μL。 SN/T 4532.2---20166样品制备检测前样品需充分混匀。7 分析步骤7.1将温育器温度设定为40℃；吸取200μL样品于微孔中，5～10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育器中温育 3 min。7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育 9 min。7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。7.4检验完毕，余下的测试条放回铝箔袋中并密封好，放到试剂盒中,2℃～8℃保存。8结果判定通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变化，需在 5 min 内进行结果判定。目视结果判定依据（如图1所示）无效：控制线（C线）不显色。a）b)[阴性：检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者强。c）弱阳性：检测线(T线)颜色写控制线(C线)颜色相当。d）阳性：检测线（T线)不显色，或检测线（T线)颜色与控制线(C线)颜色浅或者弱。控制线四环素类检测线头孢氨检测线β-内酰胺类检测线三聚氰胺检测线空白试纸四环素类头孢氨苄 β-内酰胺类：三聚氰胺阳性无效阴性弱阳性阳性阳性阳性图1]目视判定示意图9方法性能指标9.1检出限三聚氰胺：150 μg/kg;青霉素 G:3 μg/kg;氨苄西林：4 μg/kg;阿莫西林：4 μg/kg;氯唑西林8 μg/kg;苯唑西林：10 μg/kg;头孢噻呋：100 μg/kg;萘夫西林：25 μg/kg;双氯西林：15μg/kg;头孢匹2 SN/T 4532.22016林：12 μg/kg;头孢唑林：60 μg/kg;头孢哌酮：4 μg/kg；头孢乙腈：30μg/kg;头孢喹：20 μg/kg；头孢氨苄：40 μg/kg;四环素：70 μg/kg;土霉