NYT 1600-2008水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定 分光光度法.pdf

ICS 67.080B 31NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1600—2008水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法Determination of tannin content in fruit, vegetable and derived product-Spectrophotometry method2008-05-16 发布2008-07-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/ T言本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部果品及苗木质量监督检验测试中心(兴城)、中国农业科学院果树研究所。本标准主要起草人：聂继云、李静、沈贵银、杨振峰、王孝娣、李海飞、王祯旭。 NY/T 1600--2008水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法1范围本标准规定了用紫外可见分光光度法测定水果蔬菜及其制品中单宁含量的方法本标准适用于水果、蔬菜及葡萄酒中单宁含量的测定。本标准方法检出限为 0.01 mg/kg,线性范围为0mg/L～5.0mg/L。2规范性引用文件下列文件中的条款通过在本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 8855新鲜水果和蔬菜的取样方法3原理以没食子酸为主的单宁类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物，该化合物在765nm处有最大吸收，其吸收值与单宁含量呈正比，以没食子酸为标准物质,标准曲线法定量。4 试剂除非另有说明，所用水均为蒸馏水，所用试剂均为分析纯试剂。4.1钨酸钠一钼酸钠混合溶液：称取50.0g钨酸钠，12.5g钼酸钠，用350mL水溶解到1000mL回流瓶中,加入25mL磷酸及50mL盐酸，充分混匀，小火加热回流2h,再加人75g硫酸锂，25mL蒸馏水，数滴溴水，然后继续沸腾15min（至溴水完全挥发为止），冷却后，转人500mL容量瓶定容，过滤，置棕色瓶中保存，使用时稀释1倍。原液在室温下可保存半年。4.275g/L碳酸钠溶液：称取 37.5g无水碳酸钠溶于250 mL温水中,混匀,冷却,稀释至 500mL,过滤到储液瓶中备用。4.3没食子酸标准储备液：准确称取0.1100g一水合没食子酸,溶解并定容至100mL，此溶液没食子酸质量浓度为 1000mg/L。在冰箱中 2℃～3℃下可保存5d。4. 4没食子酸标准使用液：分别吸取 1000mg/ L没食子酸标准储备液 0.0 mL、1.0 mL、2.0mL、3.0mL、4.00mL和5.00 mL 至 100 mL容量瓶中,定容,溶液质量浓度为 0.0 mg/ L、10.0 mg/ L、20. 0 mg/ L.30. 0 mg/ L、40. 0 mg/ L 和 50. 0 mg/ L5仪器5.1紫外可见分光光度计。5.2组织捣碎机。5.3恒温水浴锅。5.4　电子天平：精度为0.01g和0.001g。5.5离心机:11 500 r/min。1 NY/T 1600—20086 分析步骤6.1试样的制备将果蔬样品取可食部分，用干净纱布擦去样本表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，切碎,充分混匀,按四分法取样，于组织捣碎机中匀浆备用。6.2单宁的提取称取果实匀浆 2.0g～5.0g,用80mL水洗入100mL容量瓶中,放人沸水浴中提取30min，取出，冷却，定容,吸取2.0mL样品提取液,8000 r/min 离心4 min，上清液备用;葡萄酒直接吸取2.0mL～5.0 mL稀释至 100 mL，备用。6.3标准曲线的绘制吸取 0. 00 mg/ L、10. 0 mg/ L、20. 0 mg/ L、30. 0mg/L、40. 0 mg/L、50. 0 mg/L 没食子酸标准使用液(4.4)各1.0mL,分别加5.0mL水，1.0mL钨酸钠一钼酸钠混合溶液（4.1)和3.0mL碳酸钠溶液（4.2),混匀,没食子酸标准溶液浓度分别为 0. 0 mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L、4.0 mg/L、5. 0mg/L，显色,放置 2 h，以标准曲线0.0mg/L为空白，在765nm波长下测定标准溶液的吸光度，以没食子酸浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。6.4样品的测定吸取1.0mL试样提取液（6.2），分别加入5.0mL水，1.0mL钨酸钠一钼酸钠混合溶液（4.1)和3.0mL碳酸钠溶液（4.2），显色，放置2h后，以标准曲线0.0mg/L为空白，在765nm波长下测定样品溶液的吸光度，根据标准曲线求出试样溶液的单宁浓度，以没食子酸计。如果吸光度值超过5.0mg/L没食