SN_T 3844-2014出口果汁中熊果苷的测定.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3844--2014出口果汁中熊果苷的测定Determination of arbutin in fruit juice for export2014-08-01实施2014-01-13 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局香 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准出口果汁中熊果苷的测定SN/T 3844—2014中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张 0.75字数 16 千字2014年11月第一版2014年11月第一次印刷印数 1-1 300*书号：155066·2-27412 SN/T 3844--2014前言本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国陕西出入境检验检疫局。本标准第一法主要起草人：孔祥虹、何强、乐爱山、赵坚、李建华、吴双民。本标准第二法主要起草人：何强、孔祥虹、乐爱山、赵坚、李建华、吴双民。 SN/T 3844—2014出口果汁中熊果苷的测定1范围本标准规定了果汁中熊果苷含量的液相色谱-串联质谱测定方法和液相色谱测定方法。本标准适用于苹果汁、石榴汁、橙汁、葡萄汁、桃汁等果汁中熊果苷含量的测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。丸是注日期的号用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试产色谱串联质谱3方法提要固相萃取柱和氨基固相萃取柱净化，用液相色谱稀基苯试样用水溶解后，经聚苯乙烯串联质谱仪进行测定和确证，外标4试剂和材料一级水。是的t?除另有规定外，所用试剂均方分4.1甲醇：色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于密封容器中备用4.34.4乙腈-甲醇(1+1，体积比）：量取500 mL乙腈与500mL甲醇混合均匀。4.5熊果苷标准物质（Arbutin,C12H16O，CAS:497-76~7）:纯度≥99%。4.6熊果苷标准储备溶液：准确称取适量的熊果苷标准物质，用甲醇制成1000 μg/mL的标准储备溶液,0℃～4℃保存,有效期6个月。4.7熊果苷标准工作溶液：测定时根据需要用乙腈逐级稀释，配制成适当浓度的标准工作溶液。0℃～4℃保存。4.8聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱：200 mg，6 mL 或相当者。使用前依次用 5 mL 甲醇、10 mL水活化，保持柱体湿润。.4.9氨基固相萃取柱:500mg,3mL。使用前在柱上端装填约2cm高的无水硫酸钠（4.3），用 5mL乙腈活化。保持柱体湿润。4.10微孔滤膜:0.2 μm,有机系。1 SN/T 384420145仪器和设备5.1液相色谱-串联质谱仪：配有ESI电离源、串联四级杆质量分析器。5.2分析天平:感量0.01 mg、0.01 g。5.3涡旋混合器。5.4 离心机:4 000 r/min。5.5固相萃取装置,带真空泵。5.6具塞离心管:50 mL。5.7减压旋转蒸发器。5.8浓缩瓶：50 mL。6试样制备与保存取代表性样品约500g,混合均匀，装人洁净的容器内，密闭并标明标记，于0℃～4℃保存。V测定步骤7.1　提取称取 5 g(精确至0.01 g)试样于 50 mL离心管中,加人约 20 mL水，涡旋混匀,定容至 25.0 mL,待净化。若试样中有不溶物，则提取液定容后于4 000 r/min离心3min,过滤，滤液待净化。7.2净化准确吸取5.0mL试样提取液（7.1），过聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱（4.8），控制流速2 mL/min～3 mL/min,待样品溶液流完后，减压抽干 20 min,将氨基固相萃取柱（4.9）串接在聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱下方，用 12 mL 乙腈淋洗，控制流速约 2 mL/min,弃去流出液,去掉聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱,将氨基柱再用 15 mL乙腈-甲醇(4.4)洗脱，洗脱液于 40℃水浴中减压浓缩至干,用 5.00 mL 乙腈溶解定容,过 0.2 μm 滤膜,供液相色谱-串联质谱测定和确证。7.3测定7.3.1液相色谱-串联质谱参考条件液相色谱-串联质谱参考条件如下：a）色谱柱:氨基柱,长 100 mm,内径 2.1 mm,粒径 1.7 μm,或相当者;b）流动相：乙腈-水梯度洗脱，见表1：表 1流动相条件时间流速乙腈水minmL/min%