NY_T 3539-2020CN叶螨抗药性监测技术规程.pdf

ICS 65.020.01B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3539—2020叶螨抗药性监测技术规程Technical code of practice for acaricide resistancemonitoring of spider mites2020-03-20发布2020-0701实施中华人民共和国农业农村部发布 NY/T华人民共和国农业行业标准叶端抗药性监测技术规程NY/T 3539—2020***中国农业出版社山版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码：100125网址; www, ccap, com en)北京印剧一厂印剧新华书店北京发行所发行各地新华书店经销*开本 880mmX1230mm 1/16*印张0.75字数15千字2020年6月第1版2020年6月北京第1次印刷书号; 16109 · 8115定价：18.00元版权专有侵权必究NY/T :3539—2020举报电话：（010 NY/T 3539—2020言本标准按照GB/T1.1—2009给山的规则起草，本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口，本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、河南省植保植检站，本标准主要起草人：张帅、王少丽、张友军、吴青君、闵红。H NY/T 3539—2020叶螨抗药性监测技术规程1范围本标准规定了琼脂保湿浸叶法监测叶螨抗药性的方法，本标准适用于截形叶螨TetranychustruncatusEhara和二班叶编TetranychusurticaeKoch等叶螨对杀端剂的抗药性监测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语及定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1琼脂保湿漫叶法leaf dipping method将浸过药液的叶碟放置于底部平铺有琼脂的直径3.5cm的塑料培养血上-靶标生物通过接触和取食带毒叶片而进行的生物测定方法。4试剂与材料4.1生物试材标生物：截形叶螨、二斑叶编。供试植物：未被药剂污染的菜豆（PhaseolusvulgarisL）叶片。4.2试验药剂杀端剂原药。4.3化学试剂曲拉通X-100(或吐温-80)，化学纯；丙酮或其他有机溶剂，分析纯；水为符合GB/T6682中规定的级水；琼脂粉。5仪器设备5. 1电子天平(感量0.1mg)。5. 2打孔器（@2.5cm)。5. 3塑料培养血(Φ3.5cm)。5. 4微波炉，5.5塑料移液管(5mL)。5. 6毛笔（零号)，5.7体视显微镜。5. 8人工气候箱，5.9昆虫针。5. 10酒精灯。 NY/T 3539—20205. 11塑料培养皿盖（昆虫针扎孔处理），6试验步录6.1试虫采集与饲养按随机抽样原则，在田间采集叶螨，在室内人工气候箱温度（26士1)℃、相对湿度（60士5)%、光照周期16h：8h(LD)内不接触任何药剂的情况下连续饲养1代2代用于测定。待测叶端采用无虫菜互苗进行海绵水隔高台法何养技术，6.2琼脂培养基的制作用三角瓶配制0.1%的赠200mL~300mL用微波炉充分融化，取出后用塑料移液管吸取5mL左右的液体琼脂，加入塑料培养皿底部，冷却凝固后待用。6. 3药剂溶解与配制通过预试验确定药剂的梯度浓度范围。准确称取一定量的原药（精确到0.1mg），用少量丙酮(或其他有机溶剂)溶解，按要求配制成一定浓度的母液。用移液器吸取适量母液，用含0.1%曲拉通X-100或0.1%吐温-80的水溶液按照等比梯度稀释成5个~7个系列浓度的药液。每个质量浓度药液量不宜少于 250 mL.6.4处理方法鲸脂保湿浸叶法：用打孔器将新鲜、洁净、无农药污染的菜豆叶片打成直径2.5cm的叶碟，注意避开叶脉部位。将昆虫针在酒精灯外焰上加热后，快速在塑料培养血上盖扎孔20个~30个待用。将叶碟浸于待测药液中，10s后取出晾干至叶片表面无静离水，之后将晾干的叶片叶背向上平铺于望料皿脂上。按浓度从低到高的顺序重复上述操作，每处理不少于4次重复，并设不含药剂的0.1%曲拉通X-100或0.1%吐温-80水溶液浸溃的叶片作为穿白对照。用零号毛笔挑取生理状态一致的健雌成螨25头～30头于每个叶碟上，然后盖上带孔的塑料培养皿盖，转移至温度（26士1)C、相对湿度（60士5%、光照周期16h：8h(L:D)的人工气候箱中何养和观察。6.5结果检查药剂处理24h后检查测试叶螨的死亡情况，记录每一重复对应的总端数和死亡数。用毛笔轻触虫体，试虫仅有1只足动或完全不动者视为死亡.。7数据统计与分析7.1死