DB37T 433-2004食品中游离甲醛的测定.pdf

ICS 71.080.80toxDB37山东省地電方标准DB37/T 433-2004食品中游离甲醛的测定2004-12-14发布2005-01-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 433-2004前 言本标准由山东省海洋与渔业厅提出本标准由山东省渔业标准化专业技术委员会归口本标准由山东省水产品质量检验中心负责起草本标准主要起草人：孙玉增、宫向红、高继庆、刘丽娟、徐英江 DB37/T 433-2004食品中游离甲醛的测定1范围本标准规定了用液相色谱法和比色法测定各类食品中甲醛的方法。本标准适用于各类食品中甲醛的测定。其中比色法适用于脂肪含量较低食品（如粉丝、面粉、水发海参等，其脂肪含量≤3%）甲醛含量的测定：液相色谱法适用于含脂肪较高食品（肉类、鱼类等）甲醛的测定.2食品中游甲醛的测定方法2.1液相色谱法2.1.1原理样品中的甲醛用水提取，甲醛在酸性条件下与2，4-二硝基苯耕反应，生成2，4-二硝基苯踪，经二氯甲烷提取、脱水，蒸干，甲醇溶解，0DS-C18柱分离，紫外检测器365nm检测，外标法定量。本方法检出限为0.15 mg/kg-2.1.2仪器和设备2. 1. 2.1高效液相色谱仪配紫外检测器2.1. 2. 2高速均质器2.1. 2. 3离心机2.1. 2. 4分析天平2. 1. 2. 5康氏振荡器2. 1. 3试剂2. 1. 3.1甲醛溶液（分析纯；36%~38%）2. 1. 3. 2二氯甲炕（分析纯）2. 1. 3. 3甲醇（色谱醇）2. 1. 3. 4无水硫酸钠（分析纯）2. 1. 3. 52，4-二硝基苯肼溶液称取0.100g2，4-二硝基苯（分析纯），溶于24ml浓盐酸中，用蒸馏水定容至100ml。2. 1. 3. 6甲醛标准溶液取2.80m1甲醛溶液（分析纯：36%～38%），用蒸馏水稀释至1L，碘量法标定其浓度，临用时稀释至 10mg/L2. 1. 4色谱条件2. 1. 4. 1色谱柱 0DSC18，5μm，4.6mmX250mm2. 1. 4. 2流动相甲醇/水（65/35v/v），1.0ml/min2. 1. 4. 3检测器波长365nm2.1.4.4进样量20μL2.1.5操作步骤2.1.5.1工作曲线分别取10mg/L的甲醛使用液0.10ml、0.20ml、0.40ml、0.80ml、1.00ml（相当于1.0μg、2.0μg、4.0μg、8.0μg、10μg）于具塞刻度离心管中，加水至1.0ml.加入0.5ml2，4-二硝基苯肼溶液，置600C水浴20min，然后在流水中快速冷却，加入2.0ml二减甲烧，振荡5min，再用1.0ml二氯甲1 DB37/T 433-2004烷萃取两次，合并萃取液，将萃取液用无水硫酸钠脱水，在60℃水浴旋转蒸发至干，将小烧杯放冷，加1.0m1甲醇溶解残渣，经孔径0.45μm滤膜过滤后，取20μL进样，测量保留时间和峰面积，用峰面积和甲醛含量为坐标做图，绘制工作曲线。2.1.5.2样品测定：将样品磨碎，取5.00g样品，于50l离心管中，加蒸留水15ml，于康氏报荡器振荡30min，离心，取上清液1.加，置于具塞刻度离心管中，按工作曲线操作步骤进行测定，记承峰面积，从工作曲线查得样品提取液中甲醛的含量。2.1.6计算样品中甲醛含量按下列公式计算：Y = C×I/m式中：X-样品中甲醛的含量，g/kg：C-样品溶液甲醛含量，μg/ml：I-样品溶液体积，mL：-样品质量，g。2.1.7方法回收率本方法的回收率≥75%2.1.8允许差同时测定两平行样，测定结果相对相差不大于15%，否则应重新测定。2.2比色法2.2.1原理样品在磷酸溶液中加热蒸馏出甲醛，经水吸收后与乙酰丙酮作用，生成黄色溶液，以颜色深浅比色定量。该方法检出限为5mg/kg。2.2.2仪器和设备2. 2. 2. 1可见分光光度计2. 2. 2. 2蒸馅装置具塞500ml蒸编烧瓶，20cm直型水冷凝管2.2.2.3高速均质器2.2.3试剂和溶液本标准所用试剂除非另有说明外，均为分析纯试剂，所用水除另有说明外，指蒸馏水或具有同等纯度的水2. 2. 3. 1磷酸溶液（10%）取磷酸10ml，用水稀释至100ml。2. 2. 3. 2乙酰丙酮溶液液可保存1个月）2. 2. 3. 3液体石蜡2. 2. 3. 4甲醛标准液（5μg/ml）根据储备液的浓度，精密吸取适量于100m1容量瓶中，用水定容至刻度，混匀备用（现用现配）。2.2.3.50.5%淀粉称取0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，倒入煮沸的100ml水中。2.2.3.60.1mo1/L碘溶液称取6.5g碘及17.5g碘化钾，落于50ml水中，稀释至500m1，摇匀，烂存于棕色瓶中，2.2.3.70.1mo1/L硫代硫酸钠溶液称取26