QB_T 5714-2022CN发酵液中L-赖氨酸的测定 酶电极法.pdf

ICS 67. 180. 20QBCCS X 69中华人民共和国轻工行业标准QB/T5714—2022发酵液中L-赖氨酸的测定酶电极法Determination of L-lysine in fermentation enzyme-Electrode method2022-04-08发布2022-10-01实施中华人民共和国工业和信息化部发布 QB/T言本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草，本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。本文件起草单位：山东省科学院生物研究所、山东寿光巨能金玉米开发有限公司、梁山菱花生物科技有限公司、武汉远大弘元股份有限公司、中国生物发酵产业协会、天津科技大学。本文件主要起草人：高世军、毕春元、王晋、满德恩、张文文、张成林、张金玲、李建军、吴泽华、关丹，本文件为首次发布。I QB/T酵液中L一赖氨酸的测定酶电极法1范围本文件描述了酶电极法测定发酵液中L-赖氨酸的原理、试剂和溶液、仪器和设备、试样制备和分析步骤。本文件适用于L-赖氨酸发酵生产过程中L-赖氨酸的快速测定。本文件的定量限为0.01g/L。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理赖氨酸氧化酶可特异性催化L-赖氨酸，生成相应的氧化产物和过氧化氢（H2O2），测定时，样品中L-赖氨酸向L-赖氨酸氧化酶醇膜扩散，并与赖氨酸氧化酶层接触发生酶催化反应，催化产物H2O2在电极表面产生电流信号的变化，电流信号变化量与样品中L-赖氨酸的浓度在一定范围内成线性相关确测定。H,O,→H++HO,5试剂和溶液本试验方法中，所用试剂除特殊注明外均为分析纯：水应符合GB/T6682中三级（含三级）以上的规格。- QB/T571420225.1试剂5.1.1磷酸二氢钠：相对分子质量.2磷酸氢二钠：相对分子质量141.96，5.2试剂配制缓冲溶液：用分析天平分别称取过20目分析筛的磷酸氢二钠0.85g，过20目分析筛的磷酸二氢钠0.19g，溶于100mL水中，备用，5.3标准品L-赖氨酸盐酸盐：CHisCN2O2，相对分子质量标准溶液配制L-赖氨酸标准溶液：将L-赖氨酸盐酸盐放入烘干箱，104C烘干4h，取出放干燥器冷却至室温用电子天平准确称取0.1249g烘干后的L-赖氨酸盐酸盐，放入100mL烧杯中，加入少量蒸馏水使之落解，转移至100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。密封保存。5.55L-赖氨酸氧化酶酶膜赖氨酸氧化酶0.1U（活力单位）；0℃～4℃保存。6仪器和设备6.1分子筛；20目。6.2烘干箱。6. 3分析天平：感量为0.01g.6. 4电子天平：感量为0.0001g?6.5酶电极赖氨酸分析仪：直接读数式，测量相对误差小于2%。6.6其他实验室常用仪器。7试液制备7. 1用干燥洁净容器取待测溶液1mL左右，转移至1.5mL高心管内，待测，7. 2当待测溶液中L-赖氨酸含量大于1.00g/L时，应按相应比例对待测液进行移释后再测定。8分析步操8.1校正仪器8.1.1室温下开机，启动仪器，首先用L-赖氨酸标准溶液（5.4）、缓冲溶液（5.2）进行仪器校正（半自动仪器手工校正，全自动仪器自动校正），使仪器达到可测样状态8. 1.2当酶电极响应信号小于200时，应更换新的L-赖氨酸氧化酵酶膜。 QB/T 571420228. 2测定样品8. 2. 1半自动仪器用试波（7）冲洗微量进样器，至少两次。准确吸取试液（7）25，用滤纸摄干针尖外部后注入进样口，器显示测定结束后读取显示值。8.2.2全自动仪器按仪器本身操作程序进行测定，8. 3分析结果的表述样品中L-巅氨酸的含量以X表示，按公式（1）计算：X=nR.(I) 式中;X样品中L-赖氨酸的含量，单位为克每升（g/L）：试液的稀释倍数：R仅器测定值，单位为克每升（g/L）。8. 4精密度使用该方法检测L-赖氮假，同一样品的两次测定值之差，不应超过两次测定算术平均值的2%，3 B/T中华人民共和国轻工行业标准发醇液中L-赖氨酸的测定酶电极法QB/T国轻工业出版社出版发行地址：北京东长安街6号邮政编码：100740发行电话：(01038网址: http:/Email: club@轻工业标准化编辑出版委员会编辑地址：北京西城区月坛北小街6号院邮政