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一、微生物的分离和纯培养 二元培养物: 培养物只含两种微生物,并有意识保持两者之间 的特定关系的培养物为二元培养物。 如:病毒--宿主,原生动物--细小微生物 当前第30页\共有60页\编于星期三\12点 一、微生物的分离和纯培养 微生物菌种保藏技术: 为何保藏 如何保藏 性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本要求,否则 生产或科研都无法正常进行。 要求:菌种不死,不污染,不变 中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM),中国典型培养物保藏中心(CCTCC),美国典型菌种保藏中心(ATCC)等 当前第31页\共有60页\编于星期三\12点 一、微生物的分离和纯培养 微生物菌种保藏技术: 如何保藏 根据菌种特性和保藏目的不同, 给特定环境使其存活而得以保存 连续移种或改变环境条件:干燥、低温、 缺氧、避光、缺乏营养等 当前第32页\共有60页\编于星期三\12点 斜面:可保存数周至数年,可用石蜡或橡皮塞封口,低 温延长保存时间 液体:菌苔制成菌悬液,低温(悬液保藏法) 缺点:繁琐、易污染、变异丧生原有特性 一、微生物的分离和纯培养 微生物菌种保藏技术: 传代保藏 斜面、半固体琼脂柱、液体 当前第33页\共有60页\编于星期三\12点 一、微生物的分离和纯培养 微生物菌种保藏技术: 冷冻保藏 液氮保藏、低温冰箱等 液氮可达-196℃,效果较好 注意:速冻,减少冰晶损伤细胞 当前第34页\共有60页\编于星期三\12点 一、微生物的分离和纯培养 微生物菌种保藏技术: 干燥保藏 沙土管保藏、 冷冻真空干燥保藏 沙土管:产孢子菌。制成孢子悬液,加无菌沙土管,减压抽干水分,石蜡封口,冰箱保存。 冷冻真空干燥:加保护剂样品预先冷冻,真空冰升华去水,低温保存,保存数十年,目前最普遍、最重要的方法,菌种保藏中心多采用此法。菌种保藏时采用不同手段保藏,防止某种方法失败导致菌种丧失。 当前第35页\共有60页\编于星期三\12点 二、显微镜和显微技术 决定显微观察效果重要因素:分辨率和 反差 分辨率:辨别两点之间最小距离的能力 反差:样品与背景区别程度 普通显微镜 机械装置:镜座、支架、载物台、 调焦螺旋 光学系统:物镜、目镜、聚光器 普通显微镜结构示意图 显微镜种类和原理: 当前第36页\共有60页\编于星期三\12点 二、显微镜和显微技术 光学显微镜一般配置的最大放大倍数是多少?为什么? 目镜:10 ~ 15 ╳;物镜: 100 ╳;总放大倍数1000~1500 ╳; 如何实现光学显微镜一般配置的最大放大倍数?其原理? 使用油镜,即在100 ╳物镜和载玻片之间滴加香柏油; 香柏油与玻璃折射率相近 当前第37页\共有60页\编于星期三\12点 二、显微镜和显微技术 0.5 l 分辨率(最小可分辨距离)= ———— n sin q 分辨率与所用波长成反比! 当前第38页\共有60页\编于星期三\12点 二、显微镜和显微技术 分辨率与所用波长成反比! 当前第39页\共有60页\编于星期三\12点 N:玻片与物镜间介质的折射率 空气(n=1.0)、水(n=1.33)、香柏油(n=1.52) 显微观察时可根据物镜的特性而选用不同的介质 二、显微镜和显微技术 当前第40页\共有60页\编于星期三\12点 二、显微镜和显微技术 光线在穿过折射率不同的介质时发生折射 当前第41页\共有60页\编于星期三\12点 二、显微镜和显微技术 浸没油与玻璃的折射率相近 很多原来由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的 光线可以进入物镜,使照明亮度提高,改善观察效果。 当前第42页\共有60页\编于星期三\12点 纯培养与显微技术演示文稿 当前第1页\共有60页\编于星期三\12点 纯培养与显微技术 当前第2页\共有60页\编于星期三\12点 微生物的分离和纯培养 1.无菌技术 2.用固体培养基分离纯培养 3.用液体培养基分离纯培养 4.单细胞(孢子)分离 5.选择培养分离 6.二元培养物 显微镜和显微技术 1.显微镜的种类及原理 2.显微观察样品的制备 当前第3页\共有60页\编于星期三\12点 微生物个体:小 利用群体研究属性 群体形式繁衍、保存 人为规定的条件下培养繁殖得到的 微生物群体为培养物 当前第4页\共有60页\编于星期三\12点 培养物 纯培养物 混合培养物 纯培养能较好地得到重复
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