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火炬树树叶提取物清除自由基作用研究 生物体系中包含大量脂质氧化和自由基反应。现代医学证明:衰老、癌症及炎症等疾病与体内脂质过氧化和自由基有直接关系。有些自由基会使体内的脂质与蛋白质发生链式反应, 造成相关细胞的结构与功能的破坏。氧化物和中间产物会导致生物膜、酶、组织、基因等损坏, 使人体发生病变。因此, 对清除自由基和抑制脂质过氧化效应的探讨已得到普遍关注。 火炬树 (Rhus Typhince Linn) 属漆树科植物 1 材料和方法 1.1 精细化学品分析 火炬树树叶采于青岛市, 洗净晾干后, 粉碎过80目筛备用。 茶多酚, 纯度95%, 福建松溪生物化工厂。 亚油酸, 上海来泽精细化学品厂, 分析纯。 叔丁基对苯二酚自由基 (TBHQ) , 法国罗地亚公司, 食品级。 二苯代苦味酰自由基 (DPPH) , 东京化成工业株式会社, 分析纯。 乙醇、乙酸乙酯、硫代巴比妥酸等均为分析纯。 UV-754型紫外可见分光光度计, 上海分析仪器总厂。 OX-1型化学发光分析仪 (Tohoko Electronic Industrial Co.Ltd.Japan) 1.2 实验方法 1.2.1 乙醇提取、蒸发 称取干燥后磨碎的火炬树树叶50g, 用500ml甲醇在常温下震荡浸提6h, 过滤, 滤渣同法再提取一次, 合并滤液, 弃去滤渣。将所得滤液用旋转蒸发器蒸发至粘稠后, 转移至真空干燥器干燥。然后, 将干燥物用二次蒸馏水溶解、过滤、弃去沉淀, 滤液用乙酸乙酯提取, 收集乙酸乙酯相和水相溶液。分别将水相溶液和乙酸乙酯相溶液减压浓缩, 并于真空干燥器内干燥得火炬树树叶水相提取物及乙酸乙酯相提取物。 1.2.2 抗逆效应的测定 1.2.2. dpph提取液ai 火炬树树叶对DPPH自由基的清除作用, 参照文献[3, 4]的方法, 具体操作如下:取2ml DPPH有机溶液 (10 式中:Ai=2ml DPPH溶液+2ml提取液吸光度。 Aj=2ml提取液+2ml溶剂的吸光度 Ac=2m L DPPH溶液+2ml溶剂的吸光度 1.2.2. 丙二醛生成量的测定 配制2.5%的亚油酸溶液作为底物, 分别加入占底物质量0.02%的火炬树树叶提取物、茶多酚及TBHQ, 同时以不加抗氧化物的底物作为空白, 混匀后量于 (40±1) ℃的生化培养箱中, 定时取样按文献[5]的方法测定丙二醛的生成量, 其生成量的多少以吸光度 (A) 来表示。A值越小, 其抗氧化能力越强。 1.2.2. 3.提取对三酚类化合物的o 2 结果与讨论 2.1 火灾干燥提取物对dpph自由基的去除作用 火炬树树叶提取物对DPPH自由基的清除能力以清除率来表示, 清除率越高, 说明提取物的抗氧化作用越强。在含有2.5×10 2.2 提取物的抑制作用 火炬树树叶各相提取物对亚油酸的脂质过氧化体系均有抑制能力, 其结果见表1。 各相提取物对其均有良好的抑制作用, 其作用随提取物浓度升高而增强。但同一浓度的乙酸乙酯相提取物对亚油酸脂质过氧化体系的抑制作用明显优于水相提取物, 而且在相同浓度下, 乙酸乙酯相提取物的抗氧化能力强于天然抗氧化剂茶多酚, 可与合成抗氧化物TBHQ媲美, 但水相提取物的抗氧化能力不及茶多酚和TBHQ。 2.3 燃烧树叶片的水相提取物对 火炬树树叶水相提取物对碱性连苯三酚体系产生的O 由表2可知, 火炬树树叶水相提取物对O 3 火炬树生长现出的分离自由基因子 3.1火炬树树叶各相提取物对DPPH自由基都有很强的清除作用, 且乙酸乙酯相提取物的清除能力强于水相提取物, 其清除能力随提取物浓度的增加而增大, 但当浓度达一定值之后, 其清除率不再变化。 3.2火炬树树叶各相提取物对亚油酸脂质过氧化体系都有较好的抑制作用, 其中乙酸乙酯相提取物的抑制作用强于水相提取物, 且强于同浓度的茶多酚, 但不及同浓度的TBHQ。 3.3火炬树树叶对碱性连苯三酚体系产生的