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细胞质基质与细胞内膜系统;概 念
在真核细胞的细胞质中,除去可分辨的细胞器以外的胶状物质,称细胞质基质(cytoplasmic matrix)。
曾用名
细胞液(cell sap)、
透明质(hyaloplasm)、
胞质溶胶(cytosol)、
细胞质基质等十几个名称。
由于细胞质基质的独特结构特征及较大的研究难度,以至于现在还没有一个确切而统一的概念。;5. 1. 1 细胞质基质的涵义;细胞质基质及细胞器数目和体积比;5. 1. 2 细胞质基质的功能;3)与蛋白质的修饰有关
修饰类型
辅酶或辅基与酶的共价结合。
磷酸化与去磷酸化。
糖基化。
对某些蛋白质的N端进行甲基化修饰。
酰基化。; ;5)降解变性和错误折叠的蛋白质
变性蛋白;
错误折叠的蛋白;
含被氧化或其他非正常修饰氨基酸的蛋白;
不管其N端氨基酸残基是否稳定,也常常很快被清除。
步骤:对畸形蛋白质暴露出来的氨基酸疏水基团识别-------启动对蛋白质N端第一个氨基酸残基的水解作用-------形成N端不稳定氨基酸-------依赖于泛素的蛋白降解途径水解。;6)帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠,形成正确的分子构象
靠热休克蛋白(heat shock protein,Hsp
或称stress-response protein)来完成。
;5.1.3 细胞内膜系统 (endomembrane system);(一)细 胞 内 膜 系 统 概 述;内膜系统;(二)细胞内膜系统研究方法 ;放射自显影揭示分泌蛋白的合成与转运
(用带放射性的氨基酸处理胰腺组织. Wolfe,
1993);微粒体分离;与分泌相关的不同酵母突变体使用
(研究分泌过程和相关基因);5.2 内质网 (endoplasmic reticulum,ER);5.2.1 内质网的形态结构和类型;内质网是动态变化的;2)内质网主要类型;Rough Endoplasmic Reticulum with Ribosomes (TEM x61,560).
This image is copyright Dennis Kunkel at www.DennisK, used with permission;光面内质网 (sER,或称无颗粒型ER)
ER膜光滑,无核蛋白体。
ER的单位成分常为小管,小囊。
直径50~100 nm,连接成网,
存在于能合成类固醇的细胞。
植物细胞的sER多集中在细胞壁形成的区域。
;其他形式的ER
髓样体(myeloid body):视网膜的色素上皮细胞中。
环状片层(annulate lamellae):生殖细胞、快速生长的细胞或病理上分化的细胞(包括一些癌细胞)。
微粒体(microsome);
肌质网(sarcoplasmic reticulum);5.2.2 内质网的功能;2)蛋白质的分泌
外分泌蛋白(到ER、高尔基器、溶酶体和胞内体腔的可溶性蛋白)开始时被送到ER腔。
原 因?;美国洛克菲勒大学的Blobel,1971;信号假说要点:
合成始于游离核糖体;
N端信号序列靠自由碰撞与内质网膜接触,然后插入内质网的膜;
蛋白质以袢环形式穿过内质网的膜;
蛋白的存在方式:
若信号序列被信号肽酶切除:完全进入腔;
若是停止转移信号: 形成膜蛋白。?;证据1:1960s ,George Palade 示踪技术研究培养细胞中蛋白质的分泌;证据2:蛋白质进入内质网核糖体实验 p356;实验结果:
蛋白质边合成边进入内质网,不被水解酶分解。
加入去垢剂破坏内质网膜后,可分解蛋白。
;无细胞体系进行实验
体系中加RER(微体)对产物的影响:
蛋白质长短不同。
未加微体前合成的蛋白质长(有信号序列)
加微体后蛋白质少20个氨基酸残基。
(在运出细胞时,信号系列被切除);无细胞蛋白质合成体系
左:不加微体;右:加微体,蛋白质变短,信号肽被切除。;相关功能蛋白;Signal recognition partical SRP;功 能:
识别刚从游离核糖体上合成出来的信号肽,并与之结合;
暂时终止新肽的合成;
与内质网上的停靠蛋白结合,使核糖体附着在内质网膜上,并进行新生肽的转移。
;(2)停靠蛋白(Docking protein, DP)
是SRP在内质网膜上的受体蛋白;
两个亚基:亲水的α亚基, 疏水的β亚基。
功能:
与结合有信号序列的SRP牢固结合,使正在合成蛋白质的核糖体停靠在内质网上。;(3) SRP和DP的作用;信号假说(修改后)要点;Signal hypothesis;3)跨膜蛋白的定向;单次跨膜蛋白
;两次跨膜蛋白
;多次跨膜蛋白起始与
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