CN104865387A-快速定量检测ST2和NT-proBNP的免疫荧光试纸条及其制备方法-公开.PDF

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号CN 104865387 A (10)申请公布号 (43)申请公布日2015.08.26 (43)申请公布日 (21)申请号 201510261064.1 (22)申请日 2015.05.20 (71)申请人 瑞莱生物科技（江苏）有限公司 地址 225300 江苏省泰州市中国医药城口泰 路东侧、新阳路北侧（G30幢） (72)发明人 刘红剑 威廉姆·努特 刘丽萍 张丹 黄凯 (74)专利代理机构 南京正联知识产权代理有限 公司 32243 代理人 卢霞 (51)Int.Cl. G01N 33/68 (2006.01) 权利要求书4页 说明书16页 附图1页 (54)发明名称 快速定量检测 ST2 和 NT-proBNP 的免疫荧光 试纸条及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种快速定量检测 ST2 和 NT-proBNP 的免疫荧光试纸条及其制备方法，它 包括支撑片以及支撑片上顺次搭接粘贴的样品 垫片、检测膜和吸水垫片，所述样品垫片和检测 膜之间设有偶合物垫片，所述检测膜上设有检测 线，所述检测线包被有抗ST2和/或抗NT-proBNP 单克隆抗体或多克隆抗体，所述 ST2 抗体和 / 或 NT-proBNP 抗体设在同一位置或设在相邻位置， 所述检测线另一边设有控制线，控制线包被有抗 链霉亲和素（SAV）抗体，所述偶合物垫片上涂布 有含有不同荧光标记的 ST2 抗体和 NT-proBNP 抗 体偶合物。该试纸具有方便快捷、操作简单、结果 准确等优点，适于临床快速诊断。 A 7 8 3 5 6 8 4 0 1 N C CN 104865387 A 权 利 要 求 书 1/4页 1.一种快速定量检测可溶性生长刺激表达基因 2 蛋白（ST2）和 N- 末端脑钠肽 （NT-proBNP）的免疫荧光试纸条，包括试纸条支撑片（4）以及试纸条支撑片（4）上顺次搭 接粘贴的样品垫片（1）、检测膜（2）和吸水垫片（3），所述样品垫片（1）和检测膜（2）之间设 有偶合物垫片（5），所述的偶合物垫片（5）一端上方设有第一层玻璃纤维垫片（6-1），其一 端下方设有第二层玻璃纤维垫片（6-2）或者偶合物垫片（5）一端上方仅设有第一层玻璃纤 维垫片（6-1）或者不设有任一垫片，其特征在于：所述检测膜（2）上设有检测线 1（7-1）、 检测线2（7-2），所述检测线1（7-1）包被有抗ST2单克隆抗体或多克隆抗体，所述检测线 2（7-2）包被有抗 NT-proBNP 单克隆抗体或多克隆抗体，所述的检测线 1（7-1）、检测线 2 （7-2）设在检测膜（2）的同一位置或设在相邻位置，若为不同位置，则检测线 1（7-1）、检测 线 2（7-2）均位于控制线（8）同一侧，控制线（8）包被有抗链霉亲和素（SAV）抗体，所述偶 合物垫片（5）上涂布有含有不同荧光标记的ST2抗体和NT-proBNP抗体偶合物， 所述偶尔物垫片（5）中的含有不同荧光标记的ST2抗体偶合物和NT-proBNP抗体偶合 物通过如下步骤制成： 1）Dye-649 NHS Ester-ST2抗体偶合物以及Biotin-NT-proBNP抗体的制备 1.1）Dye-649 NHS Ester-ST2抗体偶合物的制备： ST2抗体溶于碳酸盐缓冲液（0.5M Boarte buffer, pH=8.5）中，活化的Dye-