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实验六细胞染色体的制备;2008级生工何佳霖小组;2011级生工1班罗甜甜小组;华俊豪小组2011级生工1班;实验六细胞染色体制备与观察 ;一、目的与要求;二、材料、试剂与器材;3、器材:
显微镜,载玻片,盖玻片,镊子,滴管,擦镜纸,刀片,恒温水浴锅 ,离心机,离心管, 小培养皿4套,剪刀和电脑等;第9页/共28页;问 题
1、什么叫染色体?
; 由脱氧核糖核酸、蛋白质和少量核糖核酸组成的线状或棒状物,是生物主要遗传物质的载体。是细胞中可被碱性染料着色的物质。;第12页/共28页;第13页/共28页;染色体模式图;第15页/共28页;2、依据着丝粒在染色体上所处的位置划分哪四类?
1)中间着丝粒染色体(M) 2)近中间着丝粒染色体(SM) 3)近端着丝粒染色体(ST)
4)端着丝粒染色体(T) 只有一条臂。
;中期染色体分类的形态图;三、实验操作;1)、实验原理;2)、实验步骤
(1)、在实验前4-8小时,取20g左右的小白鼠,以4μg/ g体重的剂量从腹腔注射秋水仙素;
;(2)、 取材:
利用断颈法处死小白鼠,置于解剖盘内,剪开后肢皮肤和肌肉,取出动物后肢的胫骨与股骨,剔除肌肉、肌腱,将其置于小培养皿中,用生理盐水洗净,剪去长骨两端;;(3)、取1.5ml 2%柠檬酸钠用注射器注入骨髓腔中将骨髓细胞冲洗出来,然后吹打散。转入10ml离心管中。
(4)、在离心管中加8ml 0.4%KCl液,吹打散.将离心管置于37℃水浴锅内处理20min
(5)、离心:1500转/min,离心10min
(6)、弃去上清液,沿着管壁缓慢加入固定液5ml。
(7)、用吸管轻轻吹打细胞,静止固定20min,离心,弃去上清液。重复上述再固定1次。
;(8)、离心完毕,弃去固定液,依据管中细胞的量加入少量的固定液将细胞块吹打均匀,制备成细胞悬液。
(9)、在干净、湿、冷的载玻片上滴一滴细胞悬液,在酒精灯上文火烘干或晾干。
(10)、染色:在载玻片的细胞悬液上滴一滴
1:10 Giemsa磷酸盐缓冲液,染色5min。
(11)、冲洗与观察
;2、植物细胞染色体标本制备;2)实验步骤;(3) 固定:用水洗净处理过的根尖,经Carnoy固定液中固定2-4h,转入70%乙醇中,4℃保存备用。
(4) 解离:取出根尖,用蒸馏水洗净,放入10% HCl中60℃解离 15min,再用蒸馏水洗净。
(5) 染色:苯酚品红或亚甲基蓝 染色5min。
(6) 压片:把根尖放在载玻片上,加一滴45 %醋酸,盖上盖玻片,垂直轻压,使细胞和染色体分散。
(7)镜检;3、实验报告
要求:1、观察小白鼠骨髓细胞染色体的形态,
并绘制染色体图
2、对小白鼠细胞染色体和洋葱根尖细胞
或玉米根尖细胞染色体计数
;感谢您的欣赏
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