分子诊断的临床应用.pptxVIP

分子诊断的临床应用; 用分子生物学技术通过检测基因而达到诊断疾病的目的是生物学者在分子生物学技术发展的最初阶段就有的设想。 上世纪70年代人们开始在实验室进行研究，80年代以来，基因检测在许多国家已成为常规检验项目，主要用于感染性和遗传性疾病等的诊断。;; DNA重组技术(DNA recombination) 转基因技术(transgenic technique) 基因组学(genomics) 蛋白组学(proteomics) 基因治疗(genotherapy) 生物芯片(biochip)等技术 已应用到医学领域，对疾病机理的认识、疾病的诊断、预防和治疗产生了深刻的影响。 ;分子诊断不仅能早期对疾病作出确切的诊 断，也能确定个体对疾病的易感性，判别 致病基因携带者并对疾病的分期、分型、 疗效监测和预后作出判断。 分子诊断已成为实验诊断学的一个重要组 成部分，成为一门新的学科。 Molecular diagnosis Molecular diagnostics ;一、基因检测在感染性疾病中的应用;SARS相关冠状病毒的分子诊断;2003年4月，德国汉堡Bernhard-Nocht热带医学研究所学者Drosten等用随机扩增技术，获得一段长度为300bp的核苷酸序列。 根据这段序列，建立了检测新冠状病毒的常规和实时定量PCR技术。 on April 10, 2003）;第9页/共103页;检测标本 痰液、咽拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液 、血浆、粪便。 检测方法 1. 逆转录-巢式PCR (Reverse-Nested PCR) 2. 逆转录-实时PCR (Reverse-Real time PCR);第11页/共103页;有报道显示，在可能SARS病人中病毒的检出率为100%。 在疑似SARS病人中的检出率为23%。 所有健康接触者中未检测到病毒。 ;第13页/共103页;另一项研究显示 检测病毒的3种方法（血清学检测、病 毒分离、PCR技术）中，PCR技术的检出率 最高。;第15页/共103页;讨 论;讨 论;SARS相关冠状病毒基因检测必须注意的问题;肝炎病毒基因的检测 ;;;HPV基因的检测在预防宫颈癌中的作用 ;;;;;;基因检测在监测移植物排斥中的作用 ;关于多瘤病毒;;;;;;;;巴氏染色的decoy细胞;BK病毒感染的检测;肾脏移植术后病人BK病毒检测的研究;;结 果;;;;;;病例1、2;病例3;治疗前;讨 论;;;二、遗传性疾病的分子诊断; 分子诊断能够检出家系中的致病???因携带者或高危个体，能够在胎儿出生前判断其是否为患者，因此分子诊断是降低单基因遗传病发病率的根本措施。;;遗传性疾病中常见的分子异常;点突变 (point mutation);片段性突变(fragememtal mutation);动态性突变(dynamic mutation);X染色体（xq27.3）的脆性位点;遗传性疾病基因诊断的策略;DMD的基因检测;DMD基因外显子的检测;（二）间接诊断策略;间接诊断：分析DNA的遗传标记的多态性;多等位基因多态性(multi-allele);;单核苷酸多态性(single nucleotide poly- morphism，SNP);第69页/共103页;第70页/共103页;;凝血因子Ⅷ(F8)基因的主要遗传缺陷;第73页/共103页;第74页/共103页;第75页/共103页;间接诊断的不确定性;第77页/共103页;三、基因检测在多基因病中的应用;; 多基因病中的遗传因素是若干个易感基因微小作用的累加，某一易感基因结构的变化不足以导致疾病的产生。; 人类基因组多态性是多基因病基因诊断的基础，易感基因多态性的检测能帮助我们理解多基因病发生的机制，有助于对疾病的诊断和分类。;高血压候选基因多态性分析在EH中的应用前景;基因多态性与盐敏感性高血压;基因多态性与高血压靶器官损伤;ACE基因多态性与高血压靶器官损伤;基因多态性检测与个体化治疗;ATG基因多态性研究;基因多态性分析指导抗高血压药物的选择;四、肿瘤相关基因检测在肿瘤病情监测中的应用 ;;实时定量RT-PCR技术在急性早幼粒细胞白血病中的应用;PML-RAR?融合基因是 APL特异的分子标志;;;;CEA基因的定量检测 在监测胃肠癌微转移中的应用; CEA基因在消化系统上皮腺癌，尤其是直结肠癌和胃癌中高表达，而在正常成人体内极少表达。;正常人外周血CEA基因表达情况; 在肿瘤发生血道转移时，外周血中有少量肿瘤细