农业微生物课件-微生物的生长.pptVIP

? 此外，不同的微生物，甚至同一种微生物对不同物质的利用能力是不同的。有的物质可直接被利用(如葡萄糖等)；有的需经过一定适应期后才能获得利用能力(如乳糖等)。前者通常称为速效碳源(或氮源)，后者称为迟效碳源(或氮源)。当培养基中同时含有这两类碳源(或氮源)时，微生物在生长过程中会产生二次生长现象。 第四章微生物的生长 第四章微生物的生长 一条典型的生长曲线至少可以分为迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期等四个生长时期。 . 连续培养：在微生物整个培养间，以一定方式使微生物能以恒定比生长速率生长并能持续生长的一种培养方法。根据生长曲线，营养物质的消耗和代谢产物的积累是导致微生物生长停止的主要原因。因此在微生物培养过程中不断补充营养物质和以同样的速率移出培养物是实现微生物连续培养基本原则。 第四章微生物的生长 第四章微生物的生长 连续培养的优缺点 最大优点：①微生物能在比较恒定的生长条件下以恒定的生长速度生长；②缩短生长周期，提高生产设备的利用率，降低产品成本。 缺点：①营养物质的利用率低；②感染杂菌的机会增多；③菌体易老化，衰退。 微生物生长情况可通过测定单位时间里微生物数量或生物量的变化来评价。通过微生物生长的测定可客观评价培养条件、营养物质等对生长的影响，或评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果，或客观地反映微生物生长的规律。因此微生物生长的测量在理论上和实践上有着重要的意义。微生物生长的测定有计数、重量和生理指标等方法。 第四章微生物的生长 微生物生长的测定 计数法 此法通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。计数法又常分为直接计数和间接计数两类。除上述两种常用的计数方法外，还有膜过滤法、比浊法。 第四章微生物的生长 直接计数这类方法是利用特定的细菌计数板或血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。此法的缺点不能区分死菌与活菌。每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×4000×l000×稀释倍数 第四章微生物的生长 间接计数此法又称活菌计数法，其原理是在高稀释度下，微生物细胞充分分散，成单个细胞存在，每一个活的单细胞均能繁殖形成一个菌落，因而可用平皿培养的方法使每个活细胞生长并形成一个单独的菌落，通过统计长出的菌落数来推算待测样品中的活菌数。 第四章微生物的生长 具体做法：将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，再采作用混菌法或涂布法来进行测数。 但在实际操作中难以做到使所有细胞完全分开，即不能保证每个菌落都是由单项式个细胞分裂而来，所以现在多用菌落形成单位（CFU：colony forming units）来表示。 第四章微生物的生长 应用: 此法可因操作不熟练造成污染，或因培养基温度过高损伤细胞等原因造成结果不稳定。但因该法能测出样品中微量菌数，仍是教学、科研和生产上常用的测定细菌数的有效方法。土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定。但不适于测定样品中丝状体微生物，如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等营养体等。 第四章微生物的生长 膜过滤法（测活菌数）是当样品中菌数很低时，可以将一定体积的潮水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色(活菌指示剂)，并经处理使膜透明，再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数. 第四章微生物的生长 比浊法（测总菌数）原理是在一定范围内，菌悬液中细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大。因此可借助分光光度计，在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度(optical density，即O.D.)表示菌量。实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比线性范围内，否则不准确。 微生物计数法，发展迅速，现有多种多样快速、简易、自动化仪器和装置等方法。 第四章微生物的生长 重量法 此法的原理是根据每个细胞有一定的重量而设计的。它可以用于单细胞、多细胞以及丝状体微生物生长的测定。 微生物湿重 微生物干重 蛋白质总量 DNA含量 第四章微生物的生长 测定菌体湿重或干重法 原理是据每个细胞有一定的重量而设计的。它可以用于单细胞、多细胞以及丝状体微生物生长的测定。将一定体积的样品通过离心或过滤将菌体分离出来，经洗涤，再离心后直接称重，求出湿重，如是丝状体微生物，过滤后用滤纸吸去菌丝间的自由水，再称重求湿重。细菌样品和丝状菌样品，均可将它们放在已知重量的平皿或烧杯内，于10