第十六章 病毒学总论.pptVIP

病毒的血凝及血凝抑制作用 抗体 病毒红细胞凝集抑制 （HI） 红细胞 病毒颗粒 病毒红细胞凝集 （HA） 二、穿入与脱壳 穿入： 病毒粒子或核酸进入宿主细胞内的过程。 方式： 胞饮（无包膜病毒） 牛痘病毒 融合（囊膜病毒） 疱疹病毒 直接穿入 呼肠孤病毒 胞饮 融合 直接 病毒穿入与脱壳过程示意图 在细胞内病毒囊膜和 衣壳被除去，释放核酸过程。 在胞浆膜穿入并脱壳 在内吞小体脱壳 在核膜脱壳 脱壳： * 溶酶体酶消化病毒外壳 部位： 三、生物合成 生物合成：mRNA的转录、蛋白质及病毒核酸的合成 早期生物合成 晚期生物合成 合成阶段 DNA 病毒—胞核 RNA 病毒—胞浆 合成部位 病毒核酸 DNA或RNA 子代病毒核酸 mRNA 蛋白质 子代病毒 转录 复制 转录 翻译 病毒的复制—转录—翻译之间关系 转录 DNA 或 RNA mRNA ss DNA（＋）病毒 ds RNA （±） ss DNA（－）病毒 ds DNA（±） ds DNA中间产物 mRNA ss RNA （＋） ss RNA （－） ss RNA （＋） 逆转录 合成 转录 直接使用 病毒DNA复制模式图 合成DNA 母体DNA 新合成DNA 亲代DNA 依赖DNA的 RNA聚合酶 mRNA 早期蛋白 （DNA聚合酶） 亲代DNA 子代DNA 子代mRNA 晚期蛋白 （衣壳蛋白） DNA病毒的生物合成 转录 翻译 复制 转录 翻译 1.早期生物合成： 先抑制宿主细胞本身的生物合成 早期转录 mRNA 合成早期蛋白（功能蛋白，主要是酶） 病毒核酸复制 2.晚期生物合成 晚期转录 mRNA—合成晚期蛋白（主要结构蛋白） 翻译 转录 mRNA与细胞核糖体结合，翻译蛋白质 翻译蛋白后加工、修饰—磷酸化、糖基化等 病毒蛋白质翻译过程 四、组装与释放 1.无囊膜病毒： (???) 多面体病毒的组装 螺旋体病毒的组装 合成病毒蛋白质 + 病毒核酸 子代病毒颗粒 组装： 病毒 病毒受体 宿主细胞 病毒DNA 子代病毒DNA 转录 翻译 病毒蛋白质 复制 病毒吸附 病毒穿入与脱壳 生物合成 组装与释放 无囊膜病毒复制过程图 * 细胞裂解释放 2.有囊膜病毒 * 病毒出芽方式释放 (穿入细胞内) (内吞小体) (脱壳) (复制) (转录) (翻译) (病毒蛋白质) (包装) (成熟) (出芽) (游离) m 第三节 病毒与细胞的相互作用 一、病毒的培养 病毒的培养繁殖只能在活细胞内进行 病毒培养方法 细胞培养法 鸡胚培养法 实验动物培养法 （一）病毒细胞培养 1.概念：将适宜组织中的细胞分散，在培养液中进行 细胞培养，再接种病毒，让病毒在细胞中繁 殖来培养病毒的方法。 2.用途：用于分离病毒，病毒克隆纯化，病毒病诊断 及疫苗制备等。 3.特点：一致性好，材料易得，易标准化试验，可重 复性好。可通过细胞病变判定病毒感染， 也可结合免疫学技术检测细胞内的病毒。 （二）细胞培养类型 1.原代细胞： 动物组织经胰蛋白酶等消化、分散，获得单个细胞悬液， 再生长于培养器皿中而获得的细胞。如肾和睾丸最为常用。 2.二倍体细胞株： 将原代细胞单层消化分散成单个细胞，继续培养传代， 而获得的细胞（仍为二倍体）。 3. 传代细胞系：在体外培养液中可无限制分裂传代的细胞。 一般来源于肿瘤组织。有已建立的很多传代细胞系， HeLa(人子宫癌细 胞) Vero(非洲绿猴肾细胞) PK-15(猪肾细胞)等。 细胞培养注意事项 a. 病毒培养时要选择适合的宿主细胞。 b. 严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 c. 细胞培养的试剂、培养基、容器等要彻底灭菌。 d. 病毒培养之后，使细胞破裂释放病毒颗粒。 e. 培养的病毒，要冷冻保存。 (三)细胞培养的方法 1.静置培养: 细胞悬液 分装（培养瓶或培养板） 培养 5％的CO2， 37℃ 细胞可生成贴壁 单层细胞 * * 第十六章 病毒学总论 口蹄疫 禽流感 非典 AIDS 内容提要 第一节 病毒的结构 第二节 病毒的复制 第三节 病毒与细胞的相互作用 第四节 病毒的致病机理 具有一定的形态，只含有一种核酸 在活细胞内生长繁殖的非细胞型微生物。 病毒(Virus)： 病毒根据宿主 动物病毒 植物病毒 噬菌体 1892年，俄国科学家Dimitri Iwanowski 发现-烟草花叶病病毒—“细菌毒素”或极小的细菌 Dmit