NY_T 3941-2021CN 粮食中植酸含量的测定 高效液相色谱法.docx

ICS 67.060 CCS B 22 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3941—2021 粮食中植酸含量的测定 高效液相色谱法 Determination of phytic acid content in grain— High performance liquid chromatography 2021-11-09 发布 2022-05-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3941—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件起草单位：农业农村部稻米及制品质量监督检验测试中心、中国水稻研究所、中国计量大学。 本文件主要起草人：扈战强、胡贤巧、方长云、朱敏、邵雅芳、卢林、于永红、朱智伟。 NY/T 3941—2021 粮食中植酸含量的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了粮食中植酸含量的液相色谱测定方法的要求。 本文件适用于稻米、小麦、玉米、高粱、小米、绿豆、马铃薯、番薯中的植酸含量的测定， 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样用盐酸溶液提取，提取液经强阴离子交换固相萃取柱净化，高效液相色谱仪测定，外标法定量。 5 试剂和材料 5.1 通用要求：除另有规定外.所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682 中规定的一级水。 5.2 盐酸(HCl,CAS 号：7647-01-0):质量分数为36%～38%,优级纯。 5.3 磷酸二氢钠(NaH?PO;,CAS 号：7558-80-7):色谱纯。 5.4 甲 醇(CH?O)H,CAS 号：67-56-1):色谱纯。 5.5 0.5 mol/L盐酸溶液：量取43mL 盐酸(5.2),加水稀释至1000 mL。 5.6 25 mmol/L 磷酸二氢钠溶液：准确称取2.999 g 磷酸二氢钠(5.3).溶于水并稀释至1000 mL。 5.7 2.5 mmol/L磷酸二氢钠溶液：量取100 mL 磷酸二氢钠溶液(5.6),加水稀释至1000 mL。 5.8 流动相(25 mmol/L 磷酸二氢钠，5%甲醇):准确称取2.999 g 磷酸二氢钠(5.3),溶于900 mL 水 中，加入50 mL 甲醇(5.4),加水稀释至1000 mL, 摇匀，于水浴中超声脱气10 min,备用。 5.9 标准品：植酸钠(sodium phytate,CsHaNa?O2P,CAS号：14306 ·25-3),纯度≥99%。 5.10 标准溶液配制 5.10.1 标准储备液：准确称取1.4g (精确至0.1 mg) 植酸钠标准品(5.9),用25 mmol/L 磷酸二氢钠溶 液(5.6)溶解并定容至100mL, 配成浓度为10mg/mL 的标准储备溶液，于4℃下保存.有效期6个月。 5.10.2 标准工作溶液：吸取适量的植酸标准储备液(5.10.1),用25 mmol/L 磷酸二氢钠溶液(5.6)配制成 浓度为0.05 mg/mL、0.10 mg/mL、0.25 mg/mL、0.50 mg/mL、1.00mg/mL、2.00 mg/mL 和4.00 mg/mL 的标准工作溶液。 5.11 固相萃取小柱：强阴离子交换柱(100 mg/1mL)。 使用前，依次用5 mL 磷酸二氢钠溶液(5.6)和 5mL 纯水活化，保持柱体湿润。 6 仪器和设备 6.1 液相色谱仪：配紫外检测器(或二极管阵列检测器)。 2 NY/T 3941—2021 6.2 天平：感量为0.1mg、1mg 和0.01g。 6.3 离心机：转速≥10000 r/min。 6.4 超声波清洗器。 6.5 谷物粉碎机， 6.6 组织研磨仪。 6.7 旋转蒸发仪。 6.8 微孔滤膜：0.22 μm, 水相。 7 试样制备 7.1 谷物及豆类样品 将混匀的谷物及豆类样品500g,用谷物粉碎机(6.5)粉碎均匀后过孔径0.25 mm 的圆孔筛，混匀，装 入洁净的盛样袋内，备用。 7.2 薯类样品 取代表性样品500g,用干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物或清洗干净并用滤纸吸干水分，切碎，用 四分法取样