NY_T 3833-2021CN 微生物肥料菌种保藏技术规范.docx

ICS 65.080 CCS B 10 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3833—2021 微生物肥料菌种保藏技术规范 Technical specification of culture preservation for microbial fertilizers 2021-05-07 发布 2021-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3833—2021 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、中国农业微生物菌种保藏管理中心。 本文件主要起草人：李世贵、顾金刚、马晓彤、邓晖、张晓霞。 NY/T 3833—2021 微生物肥料菌种保藏技术规范 1 范围 本文件规定了微生物肥料菌种保藏的术语和定义、基本原则、技术要求和技术方法。 本文件适用于微生物肥料生产和研究的菌种保藏。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅 该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 NY/T 1113—2006 微生物肥料术语 NY/T 1847—2010 微生物肥料生产菌株质量评价通用技术要求 3 术语和定义 NY/T 1113—2006 和 NY/T 1847—2010界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 微生物肥料 microbial fertilizer 含有特定微生物活体的肥料制品。应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分 供应或促进植物生长、提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。 注：目前，微生物肥料包含微生物接种剂、复合微生物肥料和生物有机肥。 [来源：NY/T 1113—2006,2.1;NY/T 1847—2010,3.1] 3.2 菌种保藏 culture preservation 使菌种保持其活力、固有的遗传和生理生化特性，以及形态特征的微生物学技术。 [来源：NY/T 1113—2006,3.11] 3.3 定期移植法 subculturing method 将菌种接种于适宜的培养基，在最适条件下培养至稳定期后，于4℃~6℃低温保存，并间隔一定时 间进行移植培养。 注：亦称传代培养保藏法，包括斜面培养、穿刺培养和液体培养等。 3.4 液体石蜡保藏法 liquid paraffin preservation method 将菌种接种在适宜的斜面培养基上，在最适条件下培养至菌种长出健壮菌苔后，注入灭菌的液体石蜡 覆盖整个斜面，再直立放置于4℃~6℃低温或室温干燥环境进行保存。 3.5 沙土管保藏法 sand-soil pipe preservation method 将培养好的菌种用无菌水制成菌悬液或孢子悬液，滴入灭菌的沙土管中混合均匀，或直接将成熟孢子 刮下混于灭菌的沙土管中，使其吸附在沙土载体上，将管中水分抽干后，熔封管口或石蜡密封管口后置干 燥器中，置于4℃~6℃低温或室温保存。 3.6 冷冻干燥保藏法 freeze-drying preservation method 将欲保藏的菌种加入保护剂制成菌悬液后，分装于安瓿管中冻结，然后在减压条件下利用升华现象除 2 NY/T 3833—2021 去水分，达到真空干燥后，熔封管口，放置于4℃~6℃低温保存。 3.7 低温冻结保藏法 cryopreservation method 将欲保藏的菌种加入保护剂后，放置于-20℃或一80℃低温冰箱中保存。 3.8 液氮超低温保藏法 liquid nitrogen cryopreservation method 将欲保藏的菌种加入保护剂后，放置于一196 ℃的液态氮中或-150℃的氮气中保存。 4 基本原则 4.1 使用的微生物肥料菌种应安全、有效，生产者应提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、 生理生化特性及鉴定依据等完整资料，以及菌种安全性评价资料。采用生物工程菌，应获准允许大面积释 放的生物安全性有关批文。 4.2 针对特定的微生物肥料菌种应选择适宜的保藏方法，保持菌种的原有性状，避免菌种死亡、退化、变 异或污染。 4.3 菌种保藏环境应相对独立和洁净，避免菌种间的交叉污染。 4.4 菌种保藏应符合环境保护要求，不应对周围环境造成污染和危害。 4.5 菌种宜采用2种以上的保藏方法进行保存。不同