医学微生物实验课件.pptxVIP

实验一 细菌的形态结构;2、革兰氏染色 ;Structure of a Gram-Negative Cell Wall Structure of a Gram-Positive Cell Wall ;Smear preparation ;Staining;crystal violet stain wash with water ;Stain with grams iodine solution ; Counterstain with Safranin ;影响革兰染色的因素;Nutrient requirements of bacterial growth ;culture medium培养基: Substances used for artificial cultivation of bacteria. ;; Phenomena of bacterial growth细菌在培养基中的生长情况;On solid medium ：;In semisolid medium ：;;;;;形态结构变异; ? 　???????? 变形杆菌 0.1%石炭酸 迁徙生长（H） 点状生长、单个菌落（O）;遗传物质改变;Transduction转导 ;;完全转导 流产转导（abortive transduction ) ;;Specialized transduction;;;Indol test 吲哚试验 tryptophan色氨酸→indole吲哚→玫瑰吲哚 ↑ Kovacs reagent吲哚试剂 （对二甲基氨基苯甲醛）;methyl red test 甲基红试验 ;VP（Voges-Proskauer）试验;citrate utilization test 枸橼酸盐利用试验;IMViC试验(Indole Test; Methyl Red (MR) Test; Voges-Proskauer (VP) Test; Citrate Utilization Test) 大肠埃希菌 ＋　＋ － － 产气杆菌 －　－ ＋　＋;中性粒细胞的吞噬作用; 毒力 侵入部位 侵入数量 ;血浆凝固酶试验;;;化脓性球菌 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌， 淋病奈瑟菌;脓汁或 喉拭子 ;葡萄球菌鉴别;菌落小、半透明 、表面光滑、边缘整齐 G+ 、链状 ;链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，再加入SLO 乳胶试剂，因 病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。 方法：间接凝集 结果：效价大于400单位 意义：风湿热及其活动性的辅助诊断;;;;;粪便标本肠道致病菌分离鉴别流程;SS平板－分离肠道病原菌的强选择培养基;克氏双糖培养基;破伤风梭菌(C.tetani)革兰染色涂片： 菌体细长，芽胞正圆，比菌体粗，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状。;产气荚膜梭菌(C.perfringens)革兰染色涂片： 菌体粗大，两端几乎平切。芽胞呈椭圆形，位于次极端，不大于???体，体外很少形成芽胞。;培 养 特 性;Clostridium perfringens shows stormy fermentation of litmus milk. Acid turns the pH indicator litmus from blue to pink, acid and enzymes coagulate the proteins in the milk, and gas tears the curds apart. ;Nagler 反应;产气荚膜梭菌致病性试验;厌氧培养方法; 结核分枝杆菌(M.tuberculosis) 形态： 细长，略弯曲的杆菌，多聚集成团。无鞭毛,芽胞。 染色性： 不易着色，齐尼抗酸染色阳性。菌体呈红色，背景中其他物质蓝色。 培养特性： 专性需氧，最适37℃ ，营养要求高，生长缓慢，18h分裂一代。罗氏(Lowenstein-Jensen)培养基含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿，2~6周可见菌落生长，菜花、颗粒或结节状菌落，乳白色或黄色，不透明。在液体培养基，生长于表面，有皱褶。;抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5％石炭酸复红染色，再用3％盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质为蓝色(-)。 实验过程：取痰液→ 涂