药品质量管理仪器分析.pptxVIP

药品质量检测技术第一页，共七十六页。仪器分析 第二页，共七十六页。学习目标教学目标 1.掌握紫外分光光度法及可见分光光度法的 基本原理 2.掌握色谱法基本理论 3.了解分光光度法和色谱法在工业生产和科学研究 中的应用 知识要点 1.吸收光谱与物质结构的关系和光吸收基本定律 2.色谱法基本理论 技能要点 1.紫外-可见分光光度计的应用 2.GC、HPLC、TLC的基本应用 第三页，共七十六页。第一节 分光光度法一、概述二、紫外-可见分光光度法三、红外分光光度法第四页，共七十六页。一、概述分光光度法： 测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内对光的吸收度，对物质进行定性、定量分析的方法称为分光光度法。主要包括:第五页，共七十六页。 紫外分光光度（电子光谱）法：吸收光波长范围200～400nm，可用于物质的定性和定量分析。 可见分光光度（电子光谱）法：吸收光波长范围400～760nm，主要用于有色物质的定性和定量分析。二者合称为紫外-可见分光光度法即UV-ViS 红外分光光度法（IR，分子振-转光谱）：利用红外吸收光谱对物质进行分析的方 法，吸收光波长范围2.5—1000?m，主要用于已知结构的有机化合物鉴别（定性）第六页，共七十六页。二、紫外-可见分光光度法光的基本特性物质对光的选择性吸收吸收定律紫外吸收光谱的应用紫外-可见分光光度计 第七页，共七十六页。光的基本特性 光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长?、频率?、光速c、波数（cm-1）等参数来描述： ? ? = c ； 波数 = 1/ ? = ?/c 光是由光子流组成，光子的能量： E = h ? = h c / ? （Planck常数：h=6.626 × 10 -34 J × S )光的波长越短（频率越高），其能量越大。第八页，共七十六页。单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子组成）白光（太阳光）：由各种单色光组成的复合光如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混合，也可成为白光，这两种颜色的光称为互补色光。第九页，共七十六页。绿500-580青490-500黄580-600白光橙600-650青蓝480-490蓝450-480红650-780紫400-450光的互补色示意图第十页，共七十六页。物质对光的选择性吸收物质的颜色是基于物质对光有选择性吸收的结果而物质呈现的颜色则是被物质吸收光的互补色。第十一页，共七十六页。物质的吸收光谱曲线： 将不同波长的光依次通过某一固定浓度和厚度的有色溶液，分别测出它们对各种波长光的吸收程度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，画出曲线，此曲线即称为该物质的光吸收曲线（或吸收光谱曲线） 第十二页，共七十六页。?-胡罗卜素咖啡因几种有机化合物的分子吸收光谱图阿斯匹林丙酮第十三页，共七十六页。吸收定律朗伯（Lambert）和比耳（beer）分别于1760年和1852年研究了光的吸收与有色溶液按液层的厚度及溶液浓度的定量关系，奠定了分光光度分析法的理论基础。吸光度：单色光通过溶液时被吸收的程度，用A表示。第十四页，共七十六页。如果同时考虑溶液的浓度和液层的厚度都变化，都影响物质对光的吸收，则上述两个定律可合并为朗伯-比耳定律，得到：A=Kbc 此式为光吸收定律的数学表达式。 式中A称为吸光度； K是比例常数，与入射光的波长、物质的性质和溶液的温度等因素有关。第十五页，共七十六页。 吸收系数A=Kbc中比例常数K称为吸收系数；物理意义：单位浓度的溶液液层厚度为1 cm 时，在一定波长下测得的吸光度。在药品检验的实际工作中，通常有两种表示方法： 第十六页，共七十六页。质量吸收系数a当c的单位为g/L，b的单位为cm时，K用a表示，称为质量吸收系数这时朗伯-比耳定律为： A＝abc。 在药品检验中经常使用的是百分吸收系数，用（E1%1cm）表示。物理意义:当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100mL) ，液层厚度为1cm时，在一定条件下的吸收度。第十七页，共七十六页。 摩尔吸收系数ε 当式中浓度c的单位为mol/L，液层厚度的单位为cm时，则用另一符号ε表示，称为摩尔吸收系数，它表示物质的浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。其单位为L/mol·cm。这时朗伯-比耳定律就变为： A＝εbc第十八页，共七十六页。紫外吸收光谱的应用鉴别：同一物质在相同条件下，测得的紫外-可见吸收光谱应具有完全相同的特征。 对比吸收光谱特征参数 比较吸收度比值的一致性 对比吸收光谱的一致性杂质检查：药物与杂质的吸收光谱有明显差别含量测定：朗伯-比耳定律 对照品比较法 吸收系数法 计算分光光度法第十九页，共七十六页。紫外-可见分光光度计仪器的基本组成部件一般由光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示器（数据处理系统）五部分组成。