诺唯赞试剂说明书 蛋白提取 总蛋白提取试剂盒.pdf

总蛋白提取试剂盒 E211-01/02 Version 3.1 Vazyme biotech co., ltd. 产品简介 本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体软组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心 脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。本试剂盒含有的独特变性剂能够溶解 细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting 、蛋白质电泳、免疫共沉淀等蛋白研究。 产品组成 组 分 E211-01 50 rxn E211-02 100 rxn Lysis Buffer 25 ml 50 ml Protease Inhibitor Mix 100 μl 200 μl 储存条件 -20℃保存。 使用方法 A. 细胞总蛋白提取 1.裂解液制备：每500 μl冷的Lysis Buffer中加入2 μl Protease Inhibitor Mix ，混匀后置冰上备用。 2. 取5-10 × 106个细胞，在4℃，500 g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。 3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。 6 4. 每5 × 10 个细胞中加入500 μl冷的裂解液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。 5. 在4℃，16,000 g条件下离心15分钟。 6. 快速将上清转移至另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。 B. 组织总蛋白提取 1.裂解液制备：每500 μl冷的Lysis Buffer中加入2 μl Protease Inhibitor Mix ，混匀后置冰上备用。 2. 取100 mg组织样本剪碎，加入裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。 3. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，16000 g条件下离心5分钟。 4. 将上清转移至另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。 上述蛋白提取物可立即用于后续实验，或分装后于-80℃冰箱保存备用。 注意事项 1.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。 2. 整个过程须保持样品处于低温状态。 3. 蛋白浓度用BCA法测定 (E112) 。 诺唯赞生物 网址/ 咨询热线/400-600-9335 销售/sales@ 技术支持/support@ 技术服务/service@ Vazyme Biotech Co., Ltd Web/ Tel/400-600-9335 Sales/sales@ Support/support@ Service/service@