梅毒实验室检测技术及规范化性病实验室等级评定要求知识讲座课件.pptx

梅毒实验室检测技术及进展 性传播疾病实验室检测指南 性传播疾病实验室检测指南目录（2019年人民卫生出版社） 第一章 梅毒 第二章 淋病 第三章 生殖道沙眼衣原体感染 第四章 生殖器疱疹 第五章 尖锐湿疣   第六章 人类免疫缺陷病毒感染 第七章 生殖道支原体感染 第八章 性病性淋巴肉芽肿 第九章 软下疳 第十章 阴道滴虫病 第十一章 生殖道念珠菌病 第十二章 细菌性阴道病 第十三章 阴虱病  第十四章 质量管理 第十五章 性病检测实验室生物安全 每章节内容 方法介绍 （一）检测原理 （二）检测准备 （三）标本采集 （四）检测流程 （五）结果判读 （六）结果报告 （七）临床意义 方法评价 检测策略 参考文献 梅毒非特异性抗体检测操作指南 主要内容 未经治疗的梅毒患者的自然病程 感染梅毒螺旋体 2-4周 一期梅毒 中枢神经系统感染 1-2月 二期梅毒 1-3月 潜伏梅毒 2-50年 72%终生潜伏梅毒 28%三期梅毒 传播途径 梅毒主要实验室检测方法 病原学检测 梅毒血清学检测 病原学检查方法 暗视显微镜检查 核酸检测 镀银染色法检查 镀银染色检查/核酸扩增试验 疑似一期梅毒 病例146例（皮损标本） 镀银染色法 阳性率39.7% 暗视野显微镜 阳性率23.9% 一期梅毒 病例115例（皮损标本） 镀银染色法 阳性率77.4% 核酸检测 阳性率99.1% TRUST 阳性率83.5% TPPA 阳性率93.9% 二期梅毒 病例115例（皮损标本） 镀银染色法 阳性率16% 核酸检测 阳性率96% TRUST 阳性率100% TPPA 阳性率100% XX：朱邦勇等 上海：顾伟鸣等 广东：郑和平等 疑似一期梅毒 病例62例（皮损标本） 暗视野显微镜 阳性率53.2% 核酸检测 阳性率87.15% 上海：周平玉等 一期梅毒（全血、血清标本） 二期梅毒（血清标本） 核酸检测 阳性率0% 二期梅毒（全血标本） 核酸检测 阳性率<40% 结论： 镀银染色检查： 普通显微镜； 染液自配，随用随配； 技术层面，操作简单，容易掌握。 必要性（特别是一期梅毒） 值得推广（一般实验室） 病原学检查 病原学检查的临床意义 检查到梅毒螺旋体是一期、二期等梅毒诊断的依据。 如未见到梅毒螺旋体，并不能排除梅毒感染。 梅毒血清学检测 分类 梅毒非特异性抗体检测 梅毒特异性抗体检测 原理 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主3-4周产生抗类纸质抗原的抗体（反应素） 梅毒螺旋体感染人体，宿主在2-3周产生抗螺旋体的特异性抗体 抗原 抗原为心磷脂、卵磷脂和胆固醇等类纸质抗原 抗原为梅毒螺旋体特异蛋白，包括重组抗原 目标 检测患者血中的反应素（损伤指标） 检测患者血中的特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体（感染指标） 特点 未经治疗的病人，其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后，反应素可逐渐减少至转阴 一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性，则常终生阳性 梅毒血清学检测方法 梅毒螺旋体血清学试验 TPPA： 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 CLIA： 化学发光免疫试验 ELISA： 酶联免疫吸附试验 RT ： 快速检测试验 FTA-ABS：荧光螺旋体抗体吸收试验 WP： 梅毒螺旋体蛋白印迹试验 （ IgG,IgM ） 非梅毒螺旋体血清学试验 RPR： 快速血浆反应素 环状卡片试验 TRUST：甲苯胺红不加热 血清试验 VDRL： 性病研究实验室 玻片试验 梅毒非特异性抗体检测试验原理 梅毒螺旋体感染人体，人体可对被损宿主细胞以及梅毒螺旋体表面所释放的脂质作出免疫应答，产生抗类脂抗原的抗体，即非特异性抗体。 未经治疗的梅毒患者，体内产生的非特异性抗体可长期存在。经正规抗梅治疗后，非特异性抗体可以逐渐降低滴度直至转为阴性。 梅毒非特异性抗体试验操作要点—定性试验 60滴/mL，1滴=17ul 梅毒非特异性抗体血清学试验操作要点 定量试验 稀释夜准备：在反应纸板圈内加入50uL生理盐水（根据需要确定圈数),勿将盐水涂开 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。 梅毒非特异性抗体检测试剂 梅毒非特异性抗体血清学试验操作要点 水平旋转仪，转速、转幅 100r/min，约18mm 要求：1、转速恒定；2、数控计时一体化设计；3、带盖、防止挥发、生物安全； 4、加湿