用 3M-052-明矾佐剂配制的酵母表达 RBD SARS-CoV-2 疫苗可促进对非人类灵长类动物.docxVIP

用3M.052.明矶佐剂配制的酵母表达RBD SARS-CoV-2疫苗可促进对非人类灵长类动物的保护功效 佐剂增加了对COVID-19疫苗的保护 尽管针对严重急性呼吸系统综合症冠状病毒-2 (SARS-CoV- 2)的疫苗正在全球推广，但重要的是要考虑可能增加保护 的下一代SARS-CoV-2疫苗和佐剂。在这里，皮诺等 X.用酵母表达的基于RBD的SARS-CoV-2疫苗和3M- 052 (TLR7/8激动剂)-明矶为疫苗接种的恒河猴(RM), 此前已证明可诱导更好的针对人类免疫缺陷病毒的免疫反 应。将这种以3M-052-明矶为佐剂的基于RBD的疫苗与仅 以明矶佐剂的疫苗进行比拟，RM更能免受SARS-CoV-2的 攻击。这种增强的保护作用与血液和鼻粘膜中SARS-CoV-2 特异性抗体和T细胞反响的增加有关。因此，使用佐剂 3M-052-alum可能是提高SARS-CoV-2疫苗疗效的一种方 法。 抽象的正在进行的严重急性呼吸系统综合症冠状病毒-2 (SARS- CoV-2)疫苗开发的重点是确定稳定、具有本钱效益和可获 得的候选疫苗，供全球使用，特别是在低收入和中等收入 国家。在这里，我们报告了一种快速可扩展、新型酵母表 Beta VOC相比，针对SARS-CoV-2 （WA-1）的假病毒中和 效价。粗体数字表示GMT的倍数变化。（F）散点图表示 在第11周测定的抗RBD Ab IgG同种型。（G）散点图 显示第11周血清中的ADP活性。（H）散点图表示当表 达具有突变的蛋白质时，Ab依赖性NK细胞对靶细胞的 脱粒活性G614。（我）散点图说明鼻拭子中的抗RBD免 疫原特异性结合Ab活性。（J）散点图显示BAL中的抗 RBD特异性结合Ab活性。攻击前是指SARS-CoV-2攻 击前5天。（K）图表显示直肠拭子中的抗RBD免疫原 特异性结合Ab活性。图（F）至（K）中的水平线表示几何 平均值。如材料和方法中详述的，RMA用于测试随时间纵 向测量的Ab效价和假中和效价（A和D）的显着统计学 差异。**第6周时P = 0.003, *第9周时P = 0.02, 在（A）中的第11周=0.002。使用GraphPad Prism 软件 8.0版，使用非参数双尾Mann-Whitney检验测试（B）和 （F）至U （K）中Ab响应幅度的差异。P < 0.05被认为是显 着的。* （F）中IgGl的尸二0.0317和IgG4的尸二 0.0476o = 0.0317（H）和（K）o Spearman 相关分析用于 比拟（C）中免疫反响大小之间的相关性。Spearman的r 和尸值显示在图表上。 在查看器中翻开 在第二次接种后，所有接种疫苗的动物的活病毒中和滴度 均适中，但在第三次接种后增强至更高水平（图2B） o在 RBD结合和活病毒中和活性之间发现了正相关（图里）o 此外，我们使用在大多数流行的SARS-CoV-2中常见的S 蛋白中具有D614G突变的假病毒测定了中和活性（塑。 与活病毒中和活性一致，假病毒中和抗体（nAbs）在第三 次接种后两组均较高。（图2D） o然后，我们筛选了 nAb 对来自Alpha株和Beta株的带有尖峰的假病毒的反响可 能降低，这两种SARS-CoV-2关注变体（VOC）分别于 2020年在英国和南非出现。27、40 ） o —在第11周 时，在第2组和第3组的血清中分别观察到针对Alpha 菌株的nAb滴度降低了 1.8倍和1.4倍，针对Beta菌 株降低了 9.2倍和5.4倍（图2E ） ） o然后，我们在第11周检测了疫苗诱导的Ab亚类［免疫 球蛋白G （IgG） 1至4］（笠）。与第2组动物中显 着更高的抗RBD IgG4同种型相比，在第3组动物中诱导 了显着更高的抗RBD IgGl亚类反响，说明各自佐剂对 T h 1 和 T H 2反响的偏斜（ 图2F ）） o在使用Ab依赖性 吞噬作用（ADP）的第3组动物中，也存在更高的非中和 Ab效应功能的一致趋势（图2G ））和表达刺突蛋白的细 胞Ab结合试验（图S2E）很可能是由Ab亚类的平衡造 成的。最后，使用一种新的自然杀伤（NK）细胞介导的脱 粒试验（图S3）反映Ab依赖性细胞毒性（ADCC）潜力， 我们观察到与第2组相比，第3组动物血清中的反响显 着更高（图S3）。. 2H ）,并且这些ADCC反响与结合 抗体滴度呈正相关（图S2F） o我们接下来分析了呼吸道粘膜中疫苗诱导的抗体反响。我 们在第6周第二次接种后观察到鼻分泌物中抗RBD结合 Ab反响较高，第三次接种后继续增加，在第3组中最为 显着（区21）o鼻分泌物中的IgG反响与血清中的活 SARS-CoV-2中和滴度呈正相关（图S2G）,说明这些抗体 可能是血清而非黏膜来源。与第2组相比，第3