5.1DNA的粗提取与鉴定教学设计--高二下学期生物人教版选修1.docx

DNA的粗提取与鉴定 教学设计 教学目标 1、知识目标 理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。 2、能力目标 （1）初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。 （2）在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。 3、情感、态度、价值观 在科学实验过程中培养学生严谨比较细致、实事求是的科学态度。 教学重点 DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理 教学难点 DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理 课时安排 1课时 教学过程 导入：我们知道DNA分子是主要的遗传物质，因此DNA分子的研究十分重要，那么DNA分子的研究的关键是DNA分子的提取，本节课我们就讲一下DNA分子的粗提取。 实验原理 请同学们自己阅读实验原理，并展开小组讨论交流，请代表展示学习成果。 提取DNA的方法 1、提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分 2、DNA的溶解性 3、讨论： 根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图，思考在什么浓度下， DNA的溶解度最小？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？ DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA分子不溶于酒精 DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 木瓜蛋白酶可以使蛋白质分子水解，从而使蛋白质和DNA分子分开；大多数蛋白质不能忍受60—80℃高温，而且DNA在80℃以上才会变性；另外洗涤剂可以瓦解细胞膜，对DNA没有影响。 实验设计 （一）实验材料的选取(请同学自己看书找出所选实验材料) 请同学们自己结合书本内容，结合视频加深对实验操作的理解，并提前布置思考题。使学生有准备的去学习。 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 1、动物细胞 动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可 讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA （三）去除滤液中的杂质 讨论：此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质 讨论：为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质 答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质 讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？ 答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离 （四） DNA的析出与鉴定 1、DNA的析出 DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液（体积分数为95 ％） ，静置2－3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水 2、 DNA的鉴定 鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为2mol/L 的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一只加入DNA丝状物，各加入二苯胺4ml 试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否有蓝色 布置作业 课后习题 七．板书设计 DNA的粗提取与鉴定 1.破碎细胞，释放DNA 2.去除滤液中的杂质 （1）溶解细胞核内的DNA （2）DNA的析出 3. DNA的初步纯化 4.DNA的鉴定