(3.2.1)--培养基的成分与作用.ppt

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培养基的成分与作用 【知识目标】知道培养基的概念和主要营养成分。 【能力目标】能够独立进行常规培养基的制备。 任务目标 一、培养基基本概念 引入:人需要吃饭,细菌也需要“吃饭” 培养基:是指用人工方法配制的适合细菌生长繁殖的营养基质。 固体培养基 液体培养基 液体培养基 二、培养基的成分及作用 营养物质 肉浸液:是将新鲜牛肉去除脂肪、肌腱及筋膜后,浸泡、煮沸而制成的肉汁。肉汁中含有可溶性含氮浸出物、非含氮浸出物及一些生长因子。该物质可为细菌提供氮源和碳源。 营养物质 肉浸液:是将新鲜牛肉去除脂肪、肌腱及筋膜后,浸泡、煮沸而制成的肉汁。肉汁中含有可溶性含氮浸出物、非含氮浸出物及一些生长因子。该物质可为细菌提供氮源和碳源。 二、培养基的成分及作用 营养物质 糖与醇类:为细菌生长提供碳源和能量。制备培养基常用的糖类有单糖(葡萄糖、阿拉伯胶糖等)、双糖(乳糖、蔗糖等)、多糖(淀粉、菊糖等);常用醇类有甘露醇、卫茅醇等。糖、醇类物质除作为碳源和提供能量外,还用于鉴别细菌。糖类物质不耐热,高温加热时间过长会使糖破坏,因而制备此类培养基时不宜用高温灭菌,而宜用55.46kPa/cm2的压力灭菌。 二、培养基的成分及作用 二、培养基的成分及作用 血液:血液中既含有蛋白质、氨基酸、糖类及无机盐等营养物质,还能提供细菌生长所需的辅酶(如V因子)、血红素(X因子)等特殊生长因子。培养基中加入血液,适用于营养要求较高细菌的培养。含血液的培养基还可检测细菌的溶血特性。 营养物质 二、培养基的成分及作用 鸡蛋和动物血清:鸡蛋和血清不是培养基的基本成分,却是某些细菌生长所必需的营养物质,因而可用于制备特殊的培养基,如培养白喉棒状杆菌的吕氏血清培养基、培养结核分枝杆菌用的鸡蛋培养基等。 无机盐类:提供细菌生长所需要的化学元素,如钾、钠、钙、镁、铁、磷、硫等。常用的无机盐有氯化钠和磷酸盐等。氯化钠可维持细菌酶的活性及调节菌体内外渗透压;磷酸盐是细菌生长良好的磷源,并且在培养基中起缓冲作用。 生长因子:是某些细菌生长需要但自身不能合成的物质。主要包括B族维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶及特殊生长因子(X因子、V因子)等。在制备培养基时,通常加入肝浸液、酵母浸液、肉浸液及血清等,这些物质中含有细菌生长繁殖所需要的生长因子。 水:是细菌代谢过程中重要的物质,许多营养物质必须溶于水才能被细菌吸收。制备培养基常用不含杂质的蒸馏水或离子交换水。也可用自来水、井水、河水等,但此类水中常含有钙、磷、镁等,可与蛋白胨或肉浸液中磷酸盐生成不溶性的磷酸钙或磷酸镁,高压灭菌后,可析出沉淀。因而用自来水、井水等制备培养基时应先煮沸,使部分盐类沉淀,过滤后方可使用。 二、培养基的成分及作用 凝固物质 二、培养基的成分及作用 制备固体培养基时,需在培养基中加入凝固物质。最常用的凝固物质为琼脂,特殊情况下亦可使用明胶、卵清蛋白及血清等。 琼脂是从石花菜中提取的一种胶体物质,其成分主要为多糖(硫酸酚酯半乳糖)。该物质在98℃以上时可溶于水,45℃以下时则凝固成凝胶状态.且无营养作用,不被细菌分解利用,是一种理想的固体培养基赋形剂。 指示剂:在培养基中加入指示剂,可观察细菌是否利用或分解培养基中的糖、醇类物质。常用的有酚红(酚磺酞)、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中性红、中国蓝等酸碱指示剂及亚甲蓝等氧化还原指示剂。 抑制剂:在培养基中加入某种化学物质,抑制非目的菌生长而利于目的菌生长,此类物质称抑制剂。抑制剂必须具有选择性抑制作用,在制备培养基时,根据不同的目的选择不同的抑制剂。常用的有胆盐、煌绿、玫瑰红酸、亚硫酸钠、抗生素等。 二、培养基的成分及作用 谢 谢!

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