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长春博迅生物技术有限责任公司
抗人球蛋白交叉配血卡标准操作程序（SOP）
准备工作
（一）微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5
（二）检测标本的准备：
1．红细胞悬液的制备：将受血者与献血者的红细胞和血浆分离，各取其压积红细胞10微升，分别加入含1.2－1.5毫升红细胞稀释液的两个试管中，外观应为均匀淡红色，无絮状物和血块。
2．血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4℃放置 12小时，或37℃放置2小时后离心，
二、操作步骤
1、将准备好的抗人球交叉配血卡做好标记。
2、将受血者血清1滴（或50μl）与献血者红细胞1滴（或50μl）加入主侧管中。
3、将受血者红细胞1滴（或50μl）与献血者血清1滴（或50μl）加入次侧管中。
4、加样后的试剂卡，置37℃
5、使用专用离心机离心5分钟，900rpm2分钟，1500 rpm3分钟，取出肉眼观察结果。
结果判定：
1、阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部，表明受血者与献血者血型相合。
2、阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者血型不相合。
三、注意事项
1、应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时，一定要用适量EDTA的试管采血液标本，该标本不能放入4℃
2、红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
3、血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。
4、如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。
5、每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
6、红细胞悬液的浓度控制在0.5%－0.8%之间。
7、试剂卡应放在18-25℃储存，如若长期放在4
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