生物安全柜的选择使用及维护.pptVIP

生物安全柜的使用 工作结束后的要求： 将安全柜继续运行至少3min来完成“净化”过程。 将柜内物品移出前，应使用有效的消毒剂擦拭 每天实验结束后，对生物安全柜的内壁和台面进行擦拭。 等待5分钟后，关闭前窗，关灯，关风机，紫外灯照射30分钟。 视频 第三十页，共四十七页。 生物安全柜的维护 保持生物安全柜表面清洁和无污染状态 用70%酒精或者合适的消毒剂擦拭内壁和工作台面； 如果使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，需要用无菌水再次进行擦拭除去残余的消毒剂； 定期抬起工作台面对其下面的区域进行清洁； 消毒后，用玻璃清洁器对前窗玻璃和紫外灯进行清洁。 第三十一页，共四十七页。 生物安全柜的维护 定期保养： 用湿布擦拭内壁和工作台面； 每年按需要更换紫外灯和日光灯； 每年至少认证一次 ——《医学实验室—安全要求》 ——YY0569-2005 生物安全柜 ——《实验室生物安全手册》（第三版，2004） 视频 第三十二页，共四十七页。 生物安全柜的维护 生物安全柜的污染清除 甲醛、过氧化氢熏蒸等方法 应由有资质的专业人员来进行 在以下情况下需要进行熏蒸： ①在检查和维修之前 ②在更换HEPA滤器之前 ③在移动安全柜之前 ④安全柜被严重地污染 ⑤变换使用目的 ⑥长时间未用 ⑦需要熏蒸的其它时间 第三十三页，共四十七页。 生物安全柜的维护 甲醛熏蒸步骤之一----准备 电炉两个；福尔马林；氨水；100mL烧杯4个；胶带；透明塑料薄膜、75%酒精等。 使用75%酒精对生物安全柜内、外表面进行消毒清洁； 将生物安全柜和放置在同一房间内的冰箱、CO2培养箱等仪器用胶带纸进行密封处理。 视频 第三十四页，共四十七页。 * * 依 据 GB 19489—2007《实验室生物安全通用要求》 《实验室生物安全手册》（第三版，2004） ISO 15190—2003《医学实验室—安全要求》 YY0569-2005 生物安全柜（） JG170-2005 生物安全柜（） 实验室生物安全指南（第三版，2004） 生物危害一级防护：生物安全柜的选择、安装和使用（第二版，2000.9） 微生物和生物医学实验室生物安全手册（第四版，1999.4） 第一页，共四十七页。 目 的 掌握生物安全柜的选择、放置、使用和维护 熟悉生物安全柜的检测方法 第二页，共四十七页。 需要解决的六个问题 为什么选择生物安全柜？ 选择什么样的生物安全柜？ 怎样放置生物安全柜？ 怎样使用生物安全柜？ 怎样维护生物安全柜？ 怎样检测生物安全柜？ 第三页，共四十七页。 选择生物安全柜的理由 工作对象具有生物危害 原代培养物、菌毒种以及诊断性标本等 -------具有潜在感染性的实验材料 属于《人间传染的病原微生物名录》中第一、二、三和四类微生物 第四页，共四十七页。 人间传染的病原微生物名录 第五页，共四十七页。 类与级对应表 ------GB19489-2004《实验室生物安全通用要求》 第一类 第二类 第三类 第四类 第六页，共四十七页。 选择生物安全柜的理由 容易产生气溶胶的工作行为 对液体或半流体进行摇动、倾注或搅拌操作时， 将液体滴加到固体表面上或另一种液体中时， 在对琼脂板划线接种、用吸管接种细胞培养瓶， 采用多道加样器将感染性试剂的混悬液转移到微量培养板中， 对感染性物质进行匀浆及涡旋振荡， 对感染性液体进行离心， 进行动物操作时。 第七页，共四十七页。 选择生物安全柜的理由 生物安全柜能够阻止工作中所产生的气溶胶对外环境或者操作者本身产生危害，还可以减少样本之间由于气溶胶产生的交叉污染。 第八页，共四十七页。 生物安全柜基本工作原理 定向气流： 风幕 HEPA滤器： 一种一次性使用， 框架内有多重褶迭 的干性过滤材料的过滤器，对0.3微米气溶胶的过滤效 能达到99.97%。 保证排出气体和内循环气体的无菌状态。 第九页，共四十七页。 生物安全柜的选择 要素： 样品的生物危害 第一、二、三和四类病原微生物 保护样品 I级生物安全柜不保护样品 其他 是否涉及到挥发性、放射性核素或化学品 第十页，共四十七页。 生物安全柜的选择（一） 生物安全柜 进风面速率（m/s） 气流百分数 排风系统 重新循环部分 排出部分 I 级 0.36 0 100 硬管 Ⅱ级A1型 0.38～0.51 70 30 排到房间或套管连接处 外排风型Ⅱ级A2型 0.51 70 30 套管连接处 Ⅱ级B1型 0.51 30 70 硬管 Ⅱ级B2型 0.51 0 100 硬管 III级 不适用 0 100 硬管 第十一页，共四十七