实验诊断学分子诊断2015.pptx

;上海交通大学医学院;授课内容;出生缺陷筛查与遗传性疾病的实验诊断;遗传性疾病的分类 ;遗传性疾病的分类;单基因遗传病的分类;常染色体连锁遗传性疾病;常染色体连锁遗传性疾病;性染色体连锁遗传性疾病;产前筛查（诊断）;产前筛查的实验室检测;染色体病的实验室筛查;孕早期筛查（孕7～11周） 孕中期筛查（孕15～20周） 产前筛查只是对胎儿罹患某一先天性或遗传性疾病的风险评估而非确诊;中国出生缺陷现状;;关键在于预防;筛查指征;孕期保健筛查的主要疾病;新生儿筛查的主要疾病;血清学筛查的基本概念;血清学筛查的基本概念;年龄曾是唐氏综合征产前筛查的指标;产前筛查的血清标志物;;;全球筛查模式;我国开展筛查的现状及可选方案;胎儿宫内感染的实验室检查;TORCH综合征的孕前和产前检测;;;单基因遗传病的基因诊断;单基因遗传病中常见的分子异常;点突变 (point mutation);片段性突变(fragememtal mutation);动态性突变(dynamic mutation);X染色体（xq27.3）的脆性位点;遗传性疾病基因诊断的策略;直接诊断常用技术;上海交通大学医学院;直接诊断常用技术;22号内含子基因倒位的直接检测;DMD的基因检测;DMD基因外显子的检测; 直接诊断所采用的技术;（二）间接诊断策略;遗传标志及其多态性;重复序列;中度重复序列;小卫星序列 也称数量可变的串联重复序列(Variable Number of Tandem Repeat, VNTR) 以6-70bp为单位，可重复数次至数十次，以串联形式排列;;;血友病A家系间接诊断 ——bcl I位点多态性分析;血友病A家系间接诊断 ——VNTR(st14)位点多态性分析;第三代遗传学标志物——SNP 单核甘酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。 SNP是人类遗传变异中最常见的一种，占已知多态性的90%以上。平均1000个碱基会出现一个SNP，总数可达到300万个。 检测方法：SNP芯片;;;遗传咨询和产前基因诊断;遗传咨询和产前基因诊断;血浆DNA又称为循环DNA，是一种无细胞状态的胞外DNA，主要是游离的单链、双链DNA或DNA-蛋白质的混合物 它在未来分子诊断的应用中具有广阔前景 血浆DNA成分的来源分为内源性和外源性两个部分，???中入侵的病毒、细菌等病原体释放入血液的核酸是外源性血浆DNA最重要的成分;血浆DNA;间接诊断的不确定性;遗传咨询战略路线（以DMD为例）; 分子诊断在感染性疾病中的应用;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;举例：结核分枝杆菌;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;（二）SARS冠状病毒;SARS相关冠状病毒的检测 WHO推荐SARS-CoV特异性检测方法： 分子生物学检测 免疫学检测 细胞分离培养;一、感染性疾病的诊断和治疗监测;1.生物学特性及致病性 HBV对外界环境的抵抗力较强，且传染性较强 输血或注射是重要的传播途径 HBV感染后潜伏期约2～6个月，HBV DNA在肝细胞内以游离DNA和整合到宿主细胞染色体的方式存在。 HBV分为8个基因型，A～H型;;;2.乙型肝炎病毒核酸的检测 ;二、 耐药监测与分子流行病学调查;二、 耐药监测与分子流行病学调查;基因检测在监测移植物排斥中的作用 ;关于多瘤病毒;;;;;巴氏染色的decoy细胞;BK病毒感染的检测;;血浆中BK病毒核酸检测 14例病毒尿中，有5例同时出现病毒血症。 核酸载量为2×104/ml~4.8×106/ml， 平均为4.2×104/ml。 ;肿瘤相关基因检测 在肿瘤病情监测中的作用 ;乳腺癌和HER2基因;乳腺癌和HER2;HER2基因扩增： HER2基因拷贝数与17号染色体比值大于2.2;HER2基因扩增;其他的肿瘤靶向个体治疗;EGFR靶向治疗药物;肿瘤靶向个体治疗;实时定量RT-PCR技术 在急性早幼粒细胞白血病中的应用;PML-RAR?融合基因是 APL特异的分子标志;;;;CEA基因定量检测 在监测胃肠癌微转移中的应用;CEA基因在消化系统上皮腺癌，尤其是直结肠癌和胃癌中高表达，而在正常成人体内极少表达;正常人体内CEA基因表达情况;在肿瘤发生血道转移时，外周血