光谱分析技术.pptx

会计学;光学导论;光学导论;光学导论;光学导论;;光学导论;光学导论;光学导论;光学导论;光学导论;光学导论;;;紫外-可见分光光度法;什么是紫外-可见光谱;什么是紫外-可见分光光度法;基本原理;;基本原理;基本原理;基本原理; ; ;朗伯-比尔定律——定量分析的基础;朗伯-比尔定律;朗伯-比尔定律;;当用一束强度为I0的单色光垂直通过厚度为b、吸光物质浓度为c的溶液时，溶液的吸光度正比于溶液的厚度b和溶液中吸光物质的浓度c的乘积。;朗伯-比尔定律;紫外-可见分光光度计;;紫外-可见分光光度计;双光束分光光度计;吸收池的材料;石英;吸收池的形状;思考题; ; ;类 脂; ;生物分子的紫外-可见吸收光谱;微生物的紫外-可见吸收光谱;核酸蛋白测定仪;ELISA原理图;酶标仪;分子荧光光谱;什么是荧光光谱;什么是荧光光谱;基本原理;激发光谱;发射光谱;第53页/共83页;2. 三维荧光光谱;I F ∝f (λex 、λem);蒽的三维等高线光谱图 ;蒽的三维等荧光强度光谱;荧光量子产率（荧光效率）;荧光与有机化合物的结构;荧光物质的刚性和平面性增加， 有利于荧光发射。;荧光强度与浓度的关系;荧光的淬灭;荧光能量共振转移（FRET）;荧光分光光度计;紫外-可见分光光度计:;荧光分光光度计;样品池;;荧光光谱的应用;荧光光谱的应用;荧光光谱的应用;荧光光谱的应用;2.3荧光在核酸研究中的应用—分子信标;荧光光谱的应用;荧光光谱的应用;荧光光谱的应用;细 胞 标 记;活 体 标 记;1.传统的荧光分子在发光的同时，会产生具有毒性的氧自由基，导致被观察的细胞死亡，这叫做“光毒性”，因此，在绿色荧光蛋白发现以前，科学家们只能通过荧光标记来研究死亡细胞静态结构，而绿色荧光蛋白的光毒性非常弱，非常适合用于标记活细胞，在GFP出现之前这完全不可想象。 2.荧光蛋白与靶蛋白的连接可直接通过二者表达基因的融合，转导至宿主细胞，在宿主细胞中翻译表达出靶蛋白与荧光蛋白的复合体。;可以发出各种颜色荧光的荧光蛋白;荧光光谱的应用;1.量子点的荧光强度比常用的有机荧光材料高几十倍。 2.高稳定性，有机荧光材料会遭遇光漂白，长时间激发后造成荧光效率的不断降低；量子点则可承受长时间高强度的激发。 3.量子点的激发光范围广，而发射光范围窄。 （这意味着什么？）