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一、实时荧光定量PCR原理
(一)定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监 测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
(二)实时原理
1、常规PCR技术:
对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析无法对起始模板准确定量, 无法对扩增反应实时检测。
2、实时定量PCR技术:
利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变 化,通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析
3、如何对起始模板定量?
通过Ct值和标准曲线对起始模板进行定量分析.
4、几个概念:
(1)扩增曲线 :
(2)荧光阈值:
荧光信号阈值(thresho
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