免疫组织化学及其在病理诊断中的应用课件.ppt

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2021精选ppt 低分化腺癌 CK标记阳性 2.上皮膜抗原 (epithelial membrane antigen,EMA) 1)EMA为上皮细胞分泌的一种乳脂小球 糖蛋白,广泛存在于各种上皮细胞中; 2)常用的上皮源性肿瘤标记物,膜、胞浆 阳性; 3)分布与CK相似,但对内脏腺上皮优于 CK; 4)间变性大细胞淋巴瘤、横纹肌肉瘤等也 可阳性。 EMA 大网膜上低分化癌 CEA标记阳性 3. CEA (carcinoembryonic antigen): 消化道癌相关抗原,在腺癌中表达; (二)选择性上皮肿瘤标志 1.甲胎蛋白(Alpha fetoprotein, AFP): 1) 一种酸性糖蛋白,由胚胎肝细胞、卵黄 囊细胞及胎儿肠道细胞合成; 2)细胞膜或细胞浆表达; 3)主要用于原发性肝细胞癌、性腺或性腺 外生殖细胞肿瘤(如内胚窦瘤)的诊断 和鉴别诊断。 AFP标记胞浆阳性 2.前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA): A. 糖蛋白,前列腺上皮细胞特有,存在于 正常、增生及肿瘤性前列腺细胞中; B. 前列腺及其肿瘤的特异性标记,用于与 其他组织起源肿瘤进行鉴别诊断; C. 不能用于前列腺良、恶性肿瘤的鉴别。 3.黑色素瘤(melanoma,HMB45): A. 黑色素相关抗原,存在于正常人皮肤的 交界痣和蓝痣细胞中; B. 人体内非色素细胞及皮内痣、正常成人 黑色素细胞均为阴性; C. 黑色素瘤及伴有黑色素细胞分化的肿瘤 (有或无色素)特异性达100%。 HMB45阳性, 恶性黑色素瘤 (三)间叶组织源性肿瘤标记 1.波形蛋白(Vimentin,Vim): A. 细胞中间丝蛋白抗体; B. 多种软组织肿瘤均可表达,但纤维细胞 较明显; C. 常作为间叶源性与上皮源性肿瘤的一线 鉴别抗体; Vimentin胞浆阳性 2.肌源性标记 1)结蛋白(Desmin,Des):平滑肌、横纹肌均可 表达; 2)肌动蛋白(Actin/HHF35):①广泛分布于所有 肌型细胞;②平滑肌、肌上皮细胞均阳性;③在 低分化平滑肌肉瘤和横纹肌肉瘤中,敏感性和特 异性均高于Desmin。 3)肌红蛋白(myosin):分平滑肌型和横纹肌型两 种,横纹肌型特异性较强。 4)肌球蛋白(myoglobin):横纹肌标记物。 5)平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin, SMA):平滑肌标记物。 组织中平滑肌Actin标记阳性 高分化平滑肌肉瘤,瘤细胞及血管壁Actin阳性 血管壁平滑肌Actin阳性 (四)组织细胞标记物 1)CD68:全组织细胞标记物; 2)Mac387:单核组织细胞标记物。 组织细胞CD68胞浆阳性 Mac387, 组织细胞肉瘤 (五)血管源性肿瘤标记 1)CD31:血小板-内皮细胞粘附因子; 2)CD34:人骨髓干细胞抗原,血管内皮、 原始干细胞、胃肠道内外间质瘤阳性表 达。 血管内皮细胞CD34阳性 (六)神经胶质细胞标记 胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP):脑胶质细胞特异性抗体,定位于胶质细胞胞浆和突起以及胶质网。 S100蛋白(S100 protein):从牛脑中提取的一种高度酸性钙结合蛋白,胶质细胞、周围神经雪旺氏细胞、脂肪细胞、朗格罕细胞、肌上皮细胞、黑色素细胞及其肿瘤均可阳性。 树突状细胞 S-100阳性 (七)神经元标记 神经细丝蛋白(neurofiaments,NF): 神经元特异性中间丝蛋白; 中枢、外周神经元及其肿瘤阳性标记; 神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE):仅存在于神经元细胞和神 经内分泌细胞。 嗜铬素A(chromogranin A,CgA):仅存 在于神经元细胞和神经内分泌细胞。 突触素(synaptophysin,Syn):神经元突触 前小泡膜蛋白,广泛存在于神经、肌肉突触处。 五、免疫组化基本过程及注意事项: 实验设计 抗原、抗体的制备-商品化 抗体的标记-商品化 组织材料的处理(标本取材与贮存及固定、组织脱水、浸蜡、包埋等) 缓冲液及有关试剂的配制 抗体的稀释 内源性过氧化物酶的阻断 非特异性染色的消除 实验对照及结果的观察分析等。 1.切片脱蜡至水。 2.0.3%H2O2甲醇处理切片1

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