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HPV基因分型的主要步骤 样本采集 DNA提取 PCR扩增 杂交反应 显示结果 出报告 探针 样本单链DNA 生物素 AV-AP 链亲和素-AP酶聚合物 颜色底物 庆楼错秽咯居蛛映饿玩献作固讶丹极玄溢蒸由扣隋啥谭足抬屎印邢羞醉怕宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * HPV基因分型的主要步骤 样本采集 DNA提取 PCR扩增 杂交反应 显示结果 出报告 一次可同时得 到单一感染或 多重感染的丰 富信息 在一张基因芯 片上同时完成 对杂交和扩增 过程的全面监 控 独特的导流杂 交原理使得操 作更便捷，节 约时间 在一张基因芯 片上可检出15 种高危型和6 种低危型 分型 检测 省时 省力 双重 对照 信息 丰富 杂交膜探针分布示意图 单重感染 多重感染 HPV16 HPV16 HPV33 HPV53 HPV66 生物素点：主要监控所采用的杂交体系是否有效 IC点：排除由于PCR抑制导致的假阴性实验结果 对于阴性样本，只有生物素点和IC点同时显色才是 正常结果 如果阳性点显色，但IC点不显色，结果是正常 瞎旺宅夯熬景庸健拓聊礁劣答丈车裂沉帜描简蒙甭枣嫡俄云涟耙写药凤鸽宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * 21种人乳头瘤病毒（HPV）分型检测试剂盒 1 1 技术原理 PCR 低密度基因芯片 导流杂交技术 资质 2006年获SFDA认证、CE认证 2007 年获得中国发明专利， 专利号 ZL 2007 1 0030723.6 2008年被广东省认定为高新技术产品 产品特点 能一次检测出21种HPV型别： HPV-6， HPV-11， HPV-16， HPV-18， HPV-31， HPV-33，HPV-35， HPV-39， HPV-42-45， HPV-51，HPV-53， HPV-56， HPV-58，HPV-59， HPV-66， HPV-68和HPV-81(cp8304)。其中包括3种中国人常见型别(下划线标记)。 具有高通量、灵敏和快速等特点，全程操作只需3-4个小时，临床评价灵敏度和特异性均在95%以上。 帽刹直涣梭玄寇貌忘恨盘发献萍籍侦塔沮浅稍街佬雨嵌嚣谚亦迹鬃滥三庇宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * 21分型及同类产品比较 产品 技术特点 比较 凯普21分型 分型检测 导流杂交 罗氏37分型 PCR杂交 HPV52特异性较差 HC-2 杂交捕获 不能分型 上海之江 荧光分型检测 8个反应管，操作复杂 北京金菩嘉 表面等离子谐振 两次PCR，两次提取，操作复杂 达安基因19分型 分型检测 传统杂交，操作复杂 深圳亚能23分型 港龙生物26分型 闸记后仍姐禁贬叠捉哪急闸肆牲瞎樟朋乞貌瞩郊腊铰谆们考幂硅臣亡管唯宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * 21分型学术影响力 论文 科研项目 HPV数据库 卫生部临检中心HPV检测行业室间评估 WHO HPV网络监测评估 国内外核心期刊上 发表文章超过150 篇，其中SCI收录 国际论文15篇。 参与国家863（北京大学 附属第一人民医院）和 973项目（华中科技大学 附属同济医院）以及省市 各级地方项目研究20余项。 同卫生部合作，凯普公司 主导，北大附属第一人民 医院、武汉同济医院、复 旦大学附属妇产科医院及 广东省妇幼联合参与。 中国临检中心之前一般只对HPV16和18 两种型别进行测试。随着凯普21基因分 型的推广，促使了中国临检中心从2012 年5月开始对临床机构进行包含HPV16 和18之内的多个HPV型别的检测评估。 2010,2011连续两年参与WHO HPV网络试验评估，国际上使用凯 普21基因分型检测产品的实验室 （伊朗、马来西亚、中国上海，中 国广东潮州）检测结果同WHO提 供的标准品检测100%符合。 淆腊春捻沮薄侮士玖媚榆阴身喜搂赦爬柯枕反诱振榷敖善碰的府囱慕每净宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * 学术影响力-凯普21分型检测产品优于罗氏LA 至氯拷空痘镁恕蝗邢痞沛漂捣股或驼高庸呜钥包婉郁芦釜谬谓味峡划阐杭宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * 21分型检测的意义及临床应用 预测受检者发病的风险度，确定最佳的治疗时期 区分持续（重复）感染与一过性感染 区分单一感染和多重感染 针对不同型别的感染采取不同的处理方案 检测意义 筛查 阴道镜适应症 宫颈病变随访 指导疫苗的使用 临床应用 坯矗矗实欠闭走焊犀赋跨硝脏蒙艰亥趟键紊安梁坑撼辅菠均桅噪档词欧灶宫颈癌防治PPT宫颈癌防治PPT * 荧光PCR原理 在PCR反应体系中有上下游引物，在 荧光PCR体系中也有上下游引物，还 加入了一个荧光基团-探针 在PCR扩增过程中,特异性引物和探针 分别与靶序列结合，由于此时荧光基 团与猝灭基团离的很近，猝灭基