18-3 气相色谱法-第六节 定量方法20191126.pptVIP

第六节 定性与定量分析 一、定性分析方法 1）对照品对照法：已知对照物定性，定性专属性差 对照品 成份 A 样品 成份 A 成份 A 成份 A 样品 样品+对照品 试样较复杂时 简单试样 对照品对照法 片仔癀HPLC图 A.混合对照品 B.供试品 1.三七皂苷R1 2.人参皂苷Rg1 3.人参皂苷Rb1 2）相对保留值定性： r2,1=k2/k1，与组分性质、固定液性质、柱温有关，与固定液用量，柱长，流速，填充情况无关 样品 标准物：1 1.3 1.5 1.55 根据手册实验条件和标准物进样 求出相对保留值，与手册比对 3）利用保留指数定性： 准确性、重复性好，较为可靠 极性柱子，恒流模式，60℃，以3 ℃/min升至250℃的正构烷（C8-C30）色谱图 Ix，被测组分保留指数，z和z+n，正烷烃碳原子数。 4）、基团分类测定法： 利用化学反应定性，收集柱后组分，官能团反应定性鉴别（非在线），结合保留时间定性。 生成二硝基苯腙（橙色物质） 5）、联用定性（GC-MS) 进样 质谱 接口 色谱仪 计算机 分析结果 GC-MS流程图 将色谱与质谱通过适当的接口(interface)相结合。形成完整的分析仪器。 系统适用性试验 1、色谱柱的理论塔板数（n） 2、分离度（R1.5） 3、重复性：外标法：对照品连续5次进样，峰面积相对标准偏差2%，内标法：80%，100%，120%浓度对照品加内标进样，校正因子相对标准偏差2% 4、拖尾因子（T） 二、定量分析方法 系统使用性实验 外标工作曲线法 外标一点法 采用对照品 外标法 内标法 采用内标物 内标对比法 内标校正因子法 内标工作曲线法 定量分析方法 归一化法 标准加入法 （一）定量校正因子 1．绝对校正因子 绝对校正因子，单位峰面积所代表的物质i的量。与组分性质，仪器灵敏度有关 进入检测器中的物质的量或质量 峰面积积分 A?m 相对校正因子，常用相对重量校正因子fg （常用的参比：热导：苯；氢焰：庚烷） 2．相对校正因子 参比：庚烷 氢焰离子化检测器 相对重量校正因子的测定 3．注意事项： 相对校正因子与待测物、基准物和检测器类型有关， 与操作条件（进样量）无关 基准物：热导→苯；氢焰→正庚烷 过程：精称i纯品+基准物s 混匀进样 测Ai和As 1．归一化法 前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰 依据：组分含量与峰面积成正比 校正因子f差别很小，可约掉 气相中苯系物的测定 苯 甲苯 对二甲苯 + 间二甲苯 邻二甲苯 标准样品中所有的成份的含量必需已知。样品的所有的成份必需被检出。 每个成份的浓度都要被相对质量校正因子修正。 标准样品(各成份等量混合) 1000　 1500　 　 1000　 　 500　 +　 +　 +　 成份 A 的浓度是 未知浓度样品 成份 A 峰面积 1000　 2000　 500　 1000　 相对灵敏度修正以后的面积总和:　2417　 +　 +　 =　 +　 相对质量校正因子 1/2　 1/3 1/2 1　 : : :　 2　 3 2 1 500 2417　 =　20.7%　 校正面积归一法 质量比： 当各成分的校正因子未知时，可采用此方法 优点 简便，准确 定量结果与进样量、重复性无关（前提→柱子不超载） 色谱条件略有变化对结果几乎无影响 缺点： 所有组分必须在一定时间内都出峰 必须已知所有组分的校正因子 不适合微量组分的测定 归一化法优缺点 以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法 2.1 工作曲线法： 2．外标法 C Ai 浓度： C1，C2，C3，C4，C5 峰面积：A1，A2，A3，A4，A5 前提：进入检测器样品量与峰面积成正比 i纯品→工作曲线，同体积样品与之比较 浓度 糖精钠含量的测定 样品 浓度(mg/mL) 峰面积 ×106 1 0.4 1.589 2 0.8 3.184 3 1.2 4.760 4 1.6 6.270 5 2.0 7.777 峰面积：4.720 ×106 Y=3.8655x+0.0744 浓度：1.202mg/mL 糖精钠含量的测定 标准样品 1 ul (成份 A 100 ppm) 成份 A 未知样品 1 uL 成份 A 峰面积　：　700 峰面积：　1000 100 浓度(ppm) 1000 峰面积　 700 70 成份 A 的浓度是70ppm 2.2 外标一点法 前提：工作曲线线性良好，截距为0，对照品浓度与待测组分浓度接近 进样体积相等时： 甲硝唑片剂中甲硝唑含量的测定 对