HIV检测及临床意义.ppt

HIV-1抗体特异带 HIV-2抗体特异带 env gp160/gp120gp41 gp140/gp105、gp36， 也可为gp125/gp80、gp36 gag p55、p24、p17 （或p18） p56、p26、p16 pol p66（或p65）、p51、p31 p68、p53、p34 * ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? HIV抗体确认检测流程图 免疫印迹法(HIV1/2混合型) HIV-1阳性反应 可疑反应 出现HIV-2指带 HIV-1阳性报告 可疑反应 阳性反应 阴性反应 报告HIV-2血清学阳性反应报告必要时测核酸 阴性报告 免疫印迹法（HIV-2） 每3个月随访一次，共2次，仍属可疑，则作阴性报告如随访期间出现阳性反应则报告阳性 阴性反应 阴性报告 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? * P24抗原测定 （一）适用范围 HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断。 HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。 第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应， 但HIV-1抗体确认阴性者的诊断。 监测病程进展和抗病毒治疗效果。 * （三）结果报告和解释 1、HIV-1 P24抗原的阳性结果必须经过中和试验确认。 2、HIV-1 P24抗原阳性仅作为HIV感染的辅助诊断依据，不能依此确诊。 3、HIV-1 P24抗原阴性结果只表示在本试验中无反应，不能排除HIV感染。 * HIV核酸检测 * 1、辅助诊断 某些非典型的抗体反应，特别是不确定反应时，RNA的测定可提供非常有用的证据。 单纯使用RNA测定不能完全确定感染与否，但当RNA测定出现较高拷贝数的阳性结果时（1000）提示感染发生的可能性非常大。 使用此指标应综合其他检测数据和样品背景情况进行综合分析与判断。 * 2、窗口期辅助诊断 在窗口期抗原峰出现前后通常出现一个病毒载量的高峰，通常此高峰高于发病时的血浆病毒水平，早期病毒RNA测定具有特殊的意义。 目前国际上正在尝试使用这种检测对采供血样品进行多个样品混合后的RNA检测以降低窗口期传播的残余危险度。 * 3、病程监控 由于HIV感染发生后病毒载量的变化具有一定规律，并且这种变化与疾病的进程有着密切的相关性。 通常在感染后无症状期内发生的临床症状很难与AIDS发病时的症状区别，病毒载量测定可以帮助医生判断一个刚发生的症状是否与HIV感染有关。 * 4、指导治疗方案及疗效测定 并非在任何情况下感染者都应该进行抗病毒治疗，这不但是经济上的原因，更重要的是在于抗病毒药物的副作用和疗效。通常在病毒载量达到一定水平后（如35000-50000拷贝/毫升）才具有良好的效果。 只有通过治疗后病毒水平的检测才能确定治疗是否有效，通常治疗后病毒水平降低50%才被认为临床有效。 通过监测病毒滴度反映疗效 * 5、预测疾病进程 HIV疾病进程与病毒载量的关系十分密切，观察感染者病毒RNA水平可大致预测其发病的可能。如右图所示，病毒载量与6年发病率的关系为： 500时5.4%， 501-3000时16.6%，3001-10000时31.7%，10001-30000时55.2%，30000时则为80%。 * 定性检测 HIV核酸检测有定性和定量两类，定性检测用于HIV感染的辅助诊断。通常使用PCR或RT-PCR技术，使用分子生物学实验室通用的扩增试剂，引物可来自文献或自行设计，应尽量涵盖所有的或常见的毒株，也可使用复合引物。 *  定量检测 定量检测常用于监测HIV感染者的病程进展和抗病毒治疗效果。目前常用的HIV RNA定量测定方法有逆转录PCR实验（RT-PCR）、核酸序列扩增实验（NASBA）、分支DNA杂交实验（bDNA）等，这几种进口试剂盒的最低检测限为20-50拷贝/毫升 按照仪器读数报告结果，应注明使用的试验方法、样品种类和样品量。 测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平。注意低于最低检测限的结果不能排除HIV感染。 应附上仪器打印的数据。 * ? R