植物组培设备与基本技术教学.ppt

一 实验室组成和布局 便于隔离 便于操作 便于灭菌 便于观察 实验室规模 研究型 研究与小规模生产结合型 商用大规模生产型： 以工厂化生产为目的 组织培养准备实验室 1 洗涤间 规模：40-60平方米。依据工作量大小选择。 设备：实验台，专用洗涤水槽 中央台水池 洗瓶机（大工作量选用） 洗液缸（用于高洁度玻璃器皿洗涤） 烘箱（烘干，干燥灭菌） 器皿架 柜子 2 培养基配制间 规模：60平方米 设备 试剂柜，器械柜，实验台，水槽，中央台试剂架 冰箱， 不同精度天平 pH计 各种玻璃器皿 小型抽气泵（过滤灭菌用） 3 灭菌间 设备 实验台， 各式灭菌锅 排风换气设备，灭火设备，试剂柜，器械柜，水槽，中央台试剂架 冰箱， 不同精度天平 pH计 各种玻璃器皿 小型抽气泵（过滤灭菌用） 无菌操作室 用途 实验材料的接种操作，故称接种室 要求 无菌，密封，光线好。 内置超净工作台或接种箱。外设缓冲间。 THE END 3 无菌操作设备 超净工作台 用于培养物的无菌操作（由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成）。 超净台分水平式和垂直式二种类型。 4 细胞培养设备 摇 床 培养架 放置培养材料 恒温振荡培养箱 光照培养箱 控温 光照 控温 光照 振荡 控温 控光 控湿 人工气候箱 5 细胞学鉴定设备 倒置显微镜 用于分离微茎尖等等。带有照相装置。 解剖镜 1 玻璃器皿 三 培养器皿及实验用具 专用植物组织培养瓶 培养瓶要求透光度好，能耐高压高温。 适用于各种培养（如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养） 专用植物组织培养瓶也可以使用试管、三角瓶、培养皿等。 三角瓶 培养皿 适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。 工厂化生产可采用广口的200mL罐头瓶。 罐头瓶 塑料容器具有质轻、透明、不易破碎、成本低等优点 。 培养器皿还可就地取材，采用一些代用品。 培养容器和制备培养基所需的玻璃器皿逐渐被塑料器皿所代替。 现在多采用聚丙烯塑料薄膜作为封口 ,为了增加通气性，可在里面衬一层硫酸纸或牛皮纸 .也可采用专用的封口膜。 培养器皿封口 瓶口封塞可用多种方法，要具有一定的通气性和密闭性，以防止培养基干燥和杂菌污染。 聚丙烯塑料薄膜 最多采用专用塑料瓶盖 硫酸纸 牛皮纸 封口膜（石蜡膜） 硅胶瓶塞 在组织培养中配制培养基，贮藏母液，材料的消毒等需要各种化学实验用的玻璃器皿. 包括各种型号的烧杯、量筒、移液管、试剂瓶、容量瓶、、试管以及移液管架、酒精、玻璃棒、滴瓶等等。 2 金属材质用具 常应用医疗上的镊子, 根据操作需要有各种类型 镊子 切割较小材料和分离茎尖分生组织时，可用解剖刀。刀片要经常调换，使之保持锋利状态，否则切割时会造成挤压，引起周围细胞组织大量死亡，影响培养效果。 解剖针可深入到培养瓶中，转移细胞或愈伤组织。也可用于分离微茎尖的幼叶，可以自制。 解剖刀 接种针 不锈钢托盘 四 洗涤技术 1 玻璃器皿洗涤 新购置玻璃器皿 1%稀HCl 浸渍12h 洗衣粉洗涤 清水冲洗 晾干备用 已用过的玻璃器皿 植物细胞工程 PLANT CELL ENGINEERING 第三章 植物组织与器官培养 设备和基本技术 第二讲 基本实验室 辅助实验室 植物细胞工程实验室 准备室 缓冲室 无菌操作室 培养室 温 室 细胞生物学实验室 生化分析实验室 洗涤间 培养基配制间 消毒间 植物细胞工程实验室组成 实验室布局总体要求 植物细胞工程实验室布局 观察室 培养室 接种室 缓冲室 灭菌室 培养基配制 洗涤室 化学实验室 温室 实验室分区 实验室布局平面图 电炉 培养架 实验台 搁架 边台 超净台 培养架 培养架 超净台 搁架 边台 水 储物柜 冰箱 培养架 拉窗 培养室 准备室 缓冲室 无菌室 细胞生物学实验室 灭菌室 准备室 接种室 培养室 培养室 培养室 分析室 实验室布局平面图 北京锦绣大地农业股份有限公司培养室一角 组织培养准备实验室：器具的洗涤、干燥、消毒 缓冲室 位于无菌操作室外。放置拖鞋、工作服、工作帽 无菌室外观 无菌室内部 培养室 将接种的材料进行无菌培养生长的场所。 要求 控温，均匀一致； 控湿；控光；洁净（最好安装细菌过滤装置。） 器具 固定培养架，旋转式培养架，转床和摇床 5 培养室 培养室 二 仪器与设备 1 基本设备 冰箱、电炉、酸度计、纯水器、天平、培养基分装器、搅拌器等。 冰箱 用于贮存母液、各种易变质、易分解的化学药品以及植物材料等 用于种质材料、细胞保存 超低温冰箱 -86度 双蒸纯水器 单蒸纯水器 称取用量