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药理实验方法 丁苯酞又名芹菜甲素，最初发现于芹菜籽中，其药效学特点涵盖了很多方面作用：1、能改善缺血脑能量代谢；2、明显缩小大鼠局部脑缺血脑梗塞面积，改善神经功能缺失；3、改善局部脑缺血引起的脑水肿；4、对缺血区局部脑血流和软脑膜微循环有明显改善作用；5、能显著改善局部脑缺血引起的记忆障碍。在中国专2中，公开了芹菜甲素在制备预防和治疗哺乳动物或人类脑缺血引起的疾病的药物中的应用。另外在中国专3中，公开了L-丁苯酞在制备预防和治疗痴呆，尤其是阿尔茨海默病、血管性痴呆的药物中的应用。 目前市场上已经有丁苯酞软胶囊、丁苯酞氯化钠注射液等产品上市。 丁苯酞的化学结构式如式（1）： 其光学活性化合物L-丁苯酞结构式如式（2）： 2-莰醇是中国传统中药（龙脑） 中的主要成分，2-莰醇分为消旋体、右旋异构体、左旋异构体。其中，(+)-2-莰醇为天然冰片（右旋龙脑）主要成分，根据药典（中华人民共和国《药典》2021年版一部）规定，在天然冰片（右旋龙脑）中(+)-2-莰醇含量不少于96.0%；(-)-2-莰醇为艾片（左旋龙脑）主要成分，根据药典（中华人民共和国《药典》2021年版一部）规定，在艾片（左旋龙脑）中(-)-2-莰醇含量不少于85.0%；(±)-2-莰醇为冰片（合成龙脑）主要成分，根据药典（中华人民共和国《药典》2021年版一部）规定，在冰片（合成龙脑）中2-莰醇含量不少于55.0%。作为传统常用中药，冰片具有开窍醒神，清热止痛的功效，在中药中常作为“引药” 以下是丁苯酞或其光学活性化合物左旋丁基苯酞与2-莰醇或其光学活性化合物以及与天然冰片（右旋龙脑）、艾片（左旋龙脑）、冰片（合成龙脑）、分别组合的药用效果试验。 试验1：对局灶性脑缺血再灌损伤的保护作用 1.1材料与方法 1.1.1实验动物 Sprague-Dawley(SD)大鼠，雄性，清洁级，体重260-290g。 1.1.2方法 1.1.2.1脑缺血模型的制备 采用颈内动脉线栓法制备大脑中动脉阻塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）脑缺血再灌注模型。动物用7%水合三氯乙醛（6ml/kg）麻醉后,俯卧位固定于手术台上，消毒皮肤，颈部正中切开，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，轻轻剥离迷走神经，结扎并剪断颈外动脉，循颈内动脉向前，结扎翼腭动脉。夹闭颈总动脉近心端，从颈外动脉的结扎线的远端作一切口，插入外径为0.285mm的尼龙线，进过颈总动脉分叉进入颈内动脉，然后徐徐插入至有轻微阻力为止（自分叉处约20mm），阻断大脑中动脉的所有血供，右侧脑缺血2h后，轻轻拔出尼龙线，恢复血供进行再灌注，缝合皮肤，消毒。 1.1.2.2给药 制备脑缺血模型后，将动物机率均等单盲分配至各组。动物于再灌注后立即静脉给药1次，模型组动物给予等体积的生理盐水。脑缺血后24小时评价神经缺陷症状，而后处死动物，取脑，染色，拍照测定脑梗死面积。 1.1.2.3动物分组与给药剂量 DL-丁苯酞组80mg/kg、L-丁苯酞40mg/kg、DL-丁苯酞/天然冰片（右旋龙脑）80mg/kg+8mg/kg、DL-丁苯酞艾片（左旋龙脑）80mg/kg+8mg/kg、DL-丁苯酞/冰片（合成龙脑）80mg/kg+8mg/kg、L-丁苯酞/天然冰片（右旋龙脑）80mg/kg+8mg/kg、L-丁苯酞艾片（左旋龙脑）80mg/kg+8mg/kg、L-丁苯酞/ 冰片（合成龙脑）80mg/kg+8mg/kg、DL-丁苯酞/(±)-2-莰醇组 80g/kg+8mg/kg、DL-丁苯酞/（+)-2-莰醇组80mg/kg+8mg/kg、DL-丁苯酞/（-)-2-莰醇组80mg/kg+8mg/kg、L-丁苯酞/(±)-2-莰醇组 40mg/kg+8mg/kg、L-丁苯酞/（+)-2-莰醇组40mg/kg+8mg/kg、L-丁苯酞/（-)-2-莰醇组40mg/kg+8mg/kg。 1.1.2.4神经缺陷症状评分及脑梗死面积的测定 采用改良Bederson 5分制法进行神经缺陷症状评价。采用单盲法评价脑缺血后大鼠的神经缺陷症状，即由试验设计者将动物按组标记，对神经缺陷症状进行评分的试验者不知道动物的分组情况，评分结束后，评分者将各种标记的评分结果呈交设计者，由设计者揭盲，获得各试验组每只动物的评分。 神经缺陷症状评分Bederson 5分制法 0：提尾悬空时，动物的两前肢均伸向地板方向，且无其他行为缺陷。 1：提尾悬空时，动物的手术对（左）侧前肢表现为腕肘屈曲、