BJS201801食用油脂中辣椒素的测定.pdf

附件 食用油脂中辣椒素的测定 BJS 201801 1 范围 本方法规定了食用油脂中辣椒素（天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素）含量的液相 色谱 - 串联质谱测定方法。 本方法适用于食用油脂中辣椒素（天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素）含量的测定。 2 原理 试样经二氯甲烷溶解，氢氧化钠水溶液提取酸化后，过固相萃取柱净化，采用液相色谱 - 串联质谱仪检测，外标法定量。 3 试剂和材料 除另行规定外，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 乙腈（ CH CN ）：色谱纯。 3 3.1.2 甲醇（ CH 3OH ）：色谱纯。 3.1.3 甲酸（ CH 2O2 ）：质谱级。 3.1.4 二氯甲烷（ CH2Cl2 ）：色谱纯。 3.1.5 氢氧化钠（ NaOH ）：分析纯。 3.1.6 浓硫酸（ H SO ）：98% ，分析纯。 2 4 3.2 溶液配制 3.2.1 0.1% 甲酸水溶液：取甲酸（ 3.1.3 ）1 mL 用水定容至 1000 mL ，用滤膜（ 0.22 mμ，水 相）过滤后备用。 3.2.2 0.1% 甲酸乙腈溶液： 取甲酸 （3.1.3 ）1 mL 用乙腈 （3.1.1）定容至 1000 mL, 用滤膜 （0.22 μm，有机相）过滤后备用。 3.2.3 2%氢氧化钠溶液：称取 20 g 氢氧化钠（ 3.1.5 ）溶于 1000 mL 水中，摇匀备用。 3.2.4 稀硫酸（ 1+15 ）溶液：取 10 mL 浓硫酸（ 3.1.6）缓缓倒入 150 mL 水中，搅拌均匀 备用。 3.3 标准品 天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素标准品的中文名称、英文名称、 CAS 登录号、分 子式、相对分子量见附录 A 表 A.1 ，纯度 ≥98%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 标准储备液：分别称取天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素标准品（ 3.3 ）0.1 g （精确至 0.000 1 g ），用甲醇（ 3.1.2）溶解，并转移至 100 mL 容量瓶中，定容至刻度，标准 储备液浓度为 1 mg/mL 。贮存于 4 ℃冰箱中，有效期 3 个月。 3.4.2 混合标准系列工作液：分别准确吸取标准储备液（ 3.4.1）适量于容量瓶中，用甲醇 （3.1.2 ）将其稀释成含量分别为 0.1 ng/mL 、0.2 ng/mL 、0.5 ng/mL 、1 ng/mL 、5 ng/mL 、10 ng/mL 、 50 ng/mL 和 100 ng/mL 的标准系列混合工作液。临用时配制。 3.5 C 18 固相萃取（ SPE）小柱： 1000 mg ，6 mL ，或等效 SPE 柱。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱 - 串联质谱仪（ LC-MS/MS ）：配有电喷雾离子源。 4.2 超声波清洗器。 4.3 分析天平 ：感量为 0.000 1 g 。 4.4 离心机： 转速 ≥4000 r/min。 4.5 涡旋混合器。 5 分析步骤 5.1 试样制备 准确称取 1 g （精确至 0.000 1 g）样品于 10 mL 具塞塑料试管中，加入 1 mL 二氯甲烷 （3.1.4），再加入 3 mL 2% 氢氧化钠溶液（ 3.2.3），涡旋提取 10 min ，4000 r/min 离心 10 min ， 取上层水相； 残留有机相再用 3 mL 2% 氢氧化钠溶液重复提取一次， 合并水相， 再用稀硫酸溶 液 （3.2.4）调节 pH 至 2-3