医学微生物学实验课件：7细菌接合实验-.pdf

实验七细菌接合实验 学生讨论课-III 1、操作：细菌接合实验 2 、视频：病毒的分离与鉴定 3 、讨论课6 ：鲍特菌 4 、讨论课7 ：军团菌 5 、讨论课8 ：假单胞菌 细菌接合Bacterial Conjugation  细菌遗传信息水平传播途径—— 接合、转 化、转导  接合必要条件—— 仅供体方具有接合性质 粒编码蛋白组成的性菌毛  接合过程—— 性菌毛介导供、受体细胞靠 近，进而通过细胞膜融合形成接合桥，单链 DNA 5’端通过接合桥进入受体，复制/重组 细菌接合Bacterial Conjugation 细菌接合Bacterial Conjugation 细菌接合传递的遗传物质  接合性质粒：F质粒，R质粒…  可诱动传递质粒：ColE1…需接合性质粒反式 互补提供性菌毛编码功能  细菌染色体序列：需整合有接合性质粒（hfr）  跨种属接合—— 细菌抗药性水平传播  跨界接合 —— 植物冠瘿病、毛根病 （细菌DNA整合入植物基因组） 细菌接合实验 实验材料： （三人一组）  菌 株: 供体菌 鼠伤寒沙门菌氯霉素耐药株S. m. CmR+ 受体菌 大肠埃希菌氯霉素敏感株E. c. CmR-  培养基 1 ml 肉汤管3支 含氯霉素 麦康凯平板3块 无氯霉素 麦康凯平板1块  其它器材: 100 l 加样器 无菌加样枪头 细菌接合实验 供体菌 鼠伤寒沙门菌氯霉素耐药株S. m. CmR+ 受体菌 大肠埃希菌氯霉素敏感株E. c. CmR- 供体菌 受体菌 0.1ml 0.1ml 1ml肉汤 1ml肉汤 1ml肉汤 37℃温箱1-2小时培养 含氯霉素 含氯霉素 含氯霉素 无氯霉素 麦康凯培养基 麦康凯培养基 麦康凯培养基 麦康凯培养基 麦康凯平板 沙门菌 大肠埃希菌 细菌接合实验 37摄氏度过夜培养后  S. m. S. m. + E. c. E. c. E. c. Cm Cm Cm Cm-free MacConkey MacConkey MacConkey MacConkey 无色透明菌落 无色透明菌落和粉 无菌落生长 粉红色不 红色不透明菌落 透明菌落 鲍特菌属Bordetella - G coccobacillus (H. i.-like) B. pertussis • Strictly aerobic, X/V factor independent, slow growth, capsulated • Reversible phenotypic change (phase variation): fresh virulent isolate