6.2鱼类生物学材料的采集和保存.pdf

鱼类生物学材料的采集和保存技术 1. 实验试剂与仪器 2. 实验过程 l 准备工作； l 生物学材料的采集； l 样品的归纳。 （1）准备工作 l2人协同配合 一人负责测量、解剖和生物学材料采集工作，另一人负责记录和保存工作； （1）准备工作 l 鱼类生物学记录表填写：根据当日计划对记录表的编号、鱼名、解剖员等栏目进行填写； l 封口袋和离心管编号：利用记号笔对离心管和封口袋进行编号。为了防止因记号笔编号意 外涂抹后引起的样品混乱问题，还需将带有编号的硫酸纸条放入对 应的离心管和封口袋中。 （2）生物学材料的采集 l 常规生物学测量 一般测量实验鱼的体长和体重并记录； l 解剖 用解剖剪在实验鱼肛门前方剪一小口，再沿腹中线 向前剪开腹壁肌肉，注意不要损坏内脏，剪至鳃盖下 方为止，打开腹腔； （2）生物学材料的采集 l 性别和性腺发育期判断 打开腹腔后，依据性腺特征鉴定样本性别和发育 期，性腺依据体积、色泽、性细胞属性等标准划分 为6个时期，使用大写的罗马数字表示； l 去内脏重测量 将内脏团、性腺和鳔取出，称去内脏重并记录； （2）生物学材料的采集 l年龄材料的采集 a. 鳞片：在背鳍起点和侧线上方之间靠近侧线处用镊子取5~10枚大小相近鳞片，放入编号封口袋中保存； b.脊椎骨：砍下鱼头，使用解剖剪沿头部方向取5~10枚脊椎骨，清洗后放入编号封口袋中冷冻保存； c. 鳃盖骨：使用解剖剪取一对鳃盖骨，清洗后放入编号封口袋中冷冻保存； d.耳石：取出一对耳石，在乙醇溶液中清洗，并装入1.5 ml离心管中，晾干后密封保存。 （2）生物学材料的采集 l繁殖材料的采集 a.性腺称量：使用镊子和解剖剪分离性腺并称重和记录； b.繁殖力材料的采集：如果解剖的实验鱼为IV期卵巢， 我们需从一侧卵巢的前、中、后三个区域分别随机获取 一小块样品，将这三块小样混合后放入去皮的采样瓶中 称重并记录，使用记号笔对采样瓶进行编号，在瓶内放 入编号的硫酸纸条，倒入福尔马林密封保存。 （2）生物学材料的采集 l食性材料的采集 a. 充塞度判断：依据食物在肠道中所占比例判断实验鱼的肠道充塞度等 级并记录，如果实验鱼有胃，还需判断并记录胃的充塞度； b. 肠长测量：充塞度记录完成后，测量肠长并记录； c. 食物团采集：如果实验鱼前肠或者胃充塞度等级达到2级及以上，我们 使用棉线将消化道的前端和后端扎紧后放入编号的采样瓶中，倒入福尔 马林密封保存。如果鱼体较大，采样瓶不能容纳整个消化道，这时可以 仅采集前肠或胃的食物团。 （3）样品的归纳 l 采样完成后，将离心管盒盖上，并用橡皮筋将盒盖绑紧以方便携带；将 保存同一种鱼的脊椎骨、鳃盖骨和鳞片的小封口袋分别放入大封口袋中， 并在大封口袋外用记号笔标注鱼名、样品名称和起止编号范围，放入冰 箱中冷冻保存。