1260高效液相色谱议标准操作规程.docxVIP

仪器设备标准操作规程 文件编号 XXXXXXX-SOP-0006-2013 1260高效液相色谱议标准操作规程 版次 第一版 页次 1/11 编写人 XXXXXXX 修订状态 第0次 审核人 李维业 发布日期 2013.04.15 批准人 王开祥 实施日期 2013.05.20 1. 环境要求 温度应相对稳定，一般控制在15～25℃，室内保持恒温。相对湿度最好为50～70％。 2. 开机准备 2.1 检查仪器的使用登记记录，了解前一次的使用情况是否处于正常状态。操作人员需认真阅读过本标准操作规程，并经上机前操作培训。 2.2 仪器应处于正常状态，且在计量认证的有效期限内。 2.3 仪器超过一年必须送计量部门或有资格的单位复检，合格后方可使用。 3. 操作步骤 使用者必须了解仪器的工作原理，熟知注意事项，在掌握基本操作后，才能上机。 3.1 操作前的准备 3.1.1 流动相的制备 用高纯度的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水应为新鲜制备的超纯水，可用超纯水器制得或用重蒸馏水。凡规定pH值的流动相，应使用精密pH计进行调节。配制好的流动相应通过适宜的0.45um滤膜滤过，用前脱气。配制足量的流动相及时待用。 3.1.2 供试溶液的配制 供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。定量测定时，对照品溶液和样品供试溶液均应分别配制2份。供试品溶液在注入色谱仪前，一般用适宜的0.45um滤膜滤过。必要时，在配制供试品溶液前，样品需经提取净化，以免对色谱系统产生污染或干扰。 3.1.3 检查上次使用记录和仪器状态 检查色谱柱是否适用于本次试验，色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致，原溶剂瓶之溶剂与现用流动相能否互溶，流动相的pH值与该色谱柱是否相适应，仪器是否完好，仪器的各开关位置是否处于关断的位置。 3.2 测定前的准备 3.2.1 打开电源总开关，待电压稳定于230V，依次打开打印机、显示器、液相色谱仪器各 仪器设备标准操作规程 文件编号 XXXXXXX-SOP-0006-2013 1260高效液相色谱议标准操作规程 版次 第一版 页次 2/11 编写人 XXXXXXX 修订状态 第0次 审核人 李维业 发布日期 2013.04.15 批准人 王开祥 实施日期 2013.05.20 部分（在线脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器）、计算机主机的开关。 仪器自动进入初始化状态，开始自检，约30秒钟后，各部件预热完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。 3.2.2 待计算机进入WindowsXP后，双击桌面上的Agilent-1260型高效液相色谱工作站软件的快捷方式图标，Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。该页面主要由以下几部分组成： ——最上方为命令栏，依次为File,Run Control，Instrument……等； ——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件；保存文件……等； ——左边为样品信息栏； ——中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器—输液泵—柱温箱—检测器—数据处理—报告； ——中下部为动态监测信号； ——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。 3.2.3 脱气 手动打开Purge阀，逆时针旋转2-3圈，设置泵流速Flow：5ml/min，单击OK。开泵排气至所有通道无气泡为止。关闭泵或将流速设置为0mL/min，关闭Purge阀。 3.3 色谱条件的设定 色谱条件的设定可以通过以下几种方法实现： 3.3.1 直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。将鼠标移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“0K”，即完成。 仪器设备标准操作规程 文件编号 XXXXXXX-SOP-0006-2013 1260高效液相色谱议标准操作规程 版次 第一版 页次 3/11 编写人 XXXXXXX 修订状态 第0次 审核人 李维业 发布日期 2013.04.15 批准人 王开祥 实施日期 2013.05.20 3.3.2 调用已设置好的文件，在命令栏“Method”下，选择“Load Method”，或直接单击快捷操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“0K”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。如欲进行修改，则可同“6.4.1”项下，在色谱工作参数中作修改；也可以在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，随后工作站即按顺序出现一系列参数设置页面，在每个页面中键入设定值，单击“OK”，即完成。 3.3.3 编辑新文件 先在