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作业指导书(食品沙门)
编号ZQCDC /ZY50
作业指导书
第1页 共5页
第2版 第1次修
食品微生物学检验沙门氏菌检验
实施日期:2011年05月01日
1、目的:
依据GB/T4789.4—2010食品卫生微生物学检验中沙门氏菌检验规程,规范操作者的检验方法,
保证测定结果的准确性。
2、适用范围:
本标准规定了沙门氏菌检验方法,本标准适用于食品中沙门氏菌的测定。
3、责任:使操作者熟悉本规程,并在具体检验中严格遵照操作,确保检测结果准确。
4、设备和材料(除微生物实验室常规灭菌培养设备外,其它设备和材料如下:)
4.1 恒温培养箱:36℃±1℃,42℃±1℃。
4.2 冰箱:2℃~5℃。
4.3 无菌毛细管。
4.4 电子天平:感量0.1g。
4.5 均质器。
4.6 振荡器。
4.7 无菌吸管:1ml(具0.01mL刻度)、10mL、(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
4.8 无菌锥形瓶:容量250mL、500mL。
4.9 无菌培养皿:直径90mm。
4.10 PH计或PH比色管或精密PH试纸。
4.11 全自动微生物鉴定系统。
4.12 无菌试管:3mm╳50mm、10mm╳75mm
5、培养基和试剂
5.1 缓冲蛋白胨水(BPV)
5.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液
5.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液
5.4 亚硫酸铋(BS)琼脂
5.5 HE (Hektoen Enteric)琼脂
5.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂
5.7 科玛嘉沙门氏菌属显色培养基
5.8 三糖铁(TSI)琼脂
5.9 蛋白胨水、靛基质试剂
5.10 尿素琼脂(PH7.2)
5.11 氰化钾(KCN)培养基
5.12 赖氨酸脱羧酶试验培养
5.13 培养糖发酵管
5.14 邻硝基酚B-D半乳糖苷(ONPG)培养基
5.15 半固体琼脂
5.16 丙二酸钠培养基
5.17 沙门氏菌O和H诊断血清
5.18 API20E生化鉴定试剂盒或VITEK GNI+生化鉴定卡
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作业指导书(食品沙门)
编号ZQCDC /ZY50
作业指导书
第2页 共5页
第2版 第1次修
食品微生物学检验沙门氏菌检验
实施日期:2011年05月01日
6、检验程序见图1
7、操作步骤
7.1 前增菌
7.1.1 称取25g样品置盛有225mLBPW的无菌均质杯内,8000r/min~10000r/min均质1min~
2min,或放入盛有225mLBPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min,若样品为液体态,
不需要均质,振荡混匀。如需要,测定PH值,用1mol/mL无菌氢氧化钠盐酸调PH至6.8±0.2。无
菌操作将样品转至500mL锥形瓶中,如使用均质袋,可直接进行培养,于
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