米粉中菌落总数的不确定度评估报告.docx

关于编号为 2011-QW504 米粉中菌落总数不确定度评估报告 目的 评估编号为 2011-QW504米粉中菌落总数的不确定度。 依据 GB 4789.2-2010 食品微生物学检验 菌落总数的测定 适用范围 食品中菌落总数的测定 方法概要 样品制备 在无菌环境下称取 25g 样品，加入 225mL生理盐水（ 0.85%）无菌稀释液， 8000r/min 均质 1~2min，制成 1： 10 样品匀液。 样品稀释 用无菌移液管吸取 1mL上述稀释液于事先加有 9mL无菌生理盐水的无菌试管中，摇匀，制成 1：100 的样品匀液。按同样的方法制成 1：1000 的样品匀液， 每个稀释度各取 1mL稀释液加入无菌空培养皿中，并作两个平行。 培养 及时将 15~20 mL46℃琼脂倒入培养皿中， 旋转摇匀。琼脂凝固后放于 36±1℃ 培养箱中培养 48±2h。 菌落计数 手工计数培养所得菌落数或菌落计数器记录菌落数量。 数学模型 Y=x 不确定度识别及计算 不确定度来源分析 按照上述数学模型及方法概要，其不确定度主要来源有以下 3方面： ① 稀释过程引入的标准不确定度 u1； ② 加样体积的标准不确定度 u2； ③ 测量结果重复性的标准不确定度 u3。 稀释过程引入的标准不确定度 u1 1 mL移液管（ A级）最大允许误差 MPE±= 0.008 mL ，按矩形分布， k=31/2 ，其 1/2-4 1/2标准不确定度 u1v=0.008/3 =0.0046mL；无菌室温度控制在 20±5℃，查相关手册得知水的体积膨胀系数为 2.1 ×10 / ℃，按矩形分布， k＝3 1/2 -4 1/2 2）的不确定度分量 u1t 2 ） ＝1×5×2.1 ×10 －4/3 1/2 ＝0.00061mL。一次稀释过程引入的不 2确定度u1＝（ u1v 2 ＋u1t 1/2 ＝0.0046mL，本实验最多有 3次稀释过程，则 u1rel ＝ 131/2 ×u/1=0.0080 。 1 加样体积引入的标准不确定度 u2 同6.2 计算u2rel = u 1 /1=0.0046 测量结果重复性引入的标准不确定度 u3 本实验对该米粉样品进行了 15次测量，其结果见表 1。鉴于微生物测量结果分散性较大，其最大值和最小值之间可相差 2~3个数量级，因此不能直接利用测量数据作不确定度评估，而需要对数据做以下处理。 对xi 取对数lgx i ，然后分别计算 lgx i 平均值、残差、残差平方和并列入表 1 表1 表1 米粉菌落总数 15次重复测量数据及相关计算值 对数值 残差 残差平方和 序号 测量值 xi lgx lgx -lg i i x (lgx i -lg x ) 1 2400 3.3802 -0.0020 0.0000 2 1300 3.1139 -0.2683 0.07197 3 5700 3.7559 0.3737 0.1396 4 1800 3.2553 -0.1269 0.01611 5 3700 3.5682 0.1860 0.03459 6 1500 3.1761 -0.2061 0.04249 7 3800 3.5798 0.1976 0.03903 8 1400 3.1461 -0.2361 0.05574 9 2600 3.4150 0.0328 0.001073 10 1200 3.0792 -0.3030 0.09183 11 4100 3.6128 0.2306 0.05316 12 3200 3.5051 0.1229 0.01511 13 1600 3.2041 -0.1781 0.03172 14 1900 3.2788 -0.1035 0.01070 15 4600 3.6628 0.2805 0.07870 和值 40800 50.7332 ----- 0.6819 均值 2720 3.3822 ---- ---- 2 计算对数值的标准偏差 s(lgx i ) 即分散性 u(lg x ) 2 u 3 =u(lgx )= s(lgx )= lgx i lg x / n ( n  1/ 2 1) [0.6819 /(15 14)]1/ 2  0.05698 扩展不确定度 U的计算 由于u1、u2是测量值 x的不确定度，而 u3是测量值的对数值 lgx 的不确定度，因 而u3不能和 u1 ，u2计算合成不确定度。下面分两种情况讨论不确定度分量对菌落总数不确定度的影响。 u 1和u2对测量结果的影响 u1和u2 的合成不确定度 u1,2 =(0.0046 2+0.0080 2) 1/2 =0.0092，取包含因子 k=2，即 编制 编制 日期 审核 日期 批准 日期 扩展不确定度 U=0.018，在