原位杂交技术原理及其应用..ppt

原位杂交技术 in situ ;核酸分子杂交技术在研究DNA分;固相杂交是将参加反应的一条核酸;原位杂交技术的基本原理利用核酸;坦渣巫弹驮碴肇除坚强妖裳隔乎活;用原位杂交术，可在原位研究细胞;Aromase gene T;培养细胞计瑞崖荐拭邱沾铝空棠涕;原位杂交组织化学技术发展196;由于同位素标记探针具有放射性既;Pezzella（1987）创;上述生物素标记技术又叫酶促生物;近年来，地高辛（Digoxig;核酸探针的分类核酸探针根据标记;早期应用的主要是DNA探针Te;RNA探针是将特异性的cDNA;DNA合成仪的诞生使制造寡核苷;原位杂交组织化学技术的基本步骤;（一）固定 兼顾三个方面：保;在固定剂中，最常用的是多聚甲醛;（二）玻片和组织切片的处理　　;常用的粘附剂有铬矾-明胶液，其;2．增强组织的通透性和核酸探针;蛋白酶K（Proteinase;多聚甲醛固定后，浸入乙酸酐（a;3．减低背景染色 杂交;4．防止RNA酶的污染 ;（三）杂交（Hybridisa;注意事项1．探针的浓度很难事先;2．探针的长度 一般;3．杂交的温度和时间原位杂交中;从理论上讲，核苷酸杂交的有效反;4．杂交严格度（Hybridi;由于原位杂交技术多数是在Tm-;5．硫酸葡聚糖（Dextran;（四）杂交后处理（post h;（五）显示（Visualiza;（六）对照实验和ISHH结果的;ISHH对照试验一览表核乳胶或;从理论上讲，对照试验设置愈多其;ISHH的最大优点是它的高度特;1、使用地高辛标记的核酸探针进;15）杂交；第二天????16;2、使用地高辛标记的寡核苷酸探;15）杂交；第二天????16;成年大鼠海马、齿状回DAT1m;A 大鼠舌下神经核(12)D;FISH – Fluoresc;FISH1616例如左图:通过;使用Vysis AneuVys;5号染色体上杂交了7种探针，这;实例: X / Y 着丝点探;单个或多个全染色体（WCP) ;杂交到有爪蟾蜍染色体上的卫星探;Multi- color IS;人类频谱染色体组型分析频谱 F;实习课实习时间： 共聚焦：1;Thanks匹镊初滤佳渍卉晤窘