作物栽培学：实验1 稻米直链淀粉含量测定.ppt

实验1 稻米直链淀粉含量测定 1、 实验原理： 稻米（包括其它谷物）中的淀粉均存在着直链淀粉和支链淀粉两种组分。直链淀粉不溶于冷水，能溶于热水，与碘能生成稳定络合物，呈深蓝色。支链淀粉只有在加热条件下才能溶解于水，与碘不能形成稳定的络合物，所以呈现较浅的蓝紫色。应用这个原理，可测定此络合物在620nm波长处的消光值，可测定样品中的直链淀粉百分含量。 2、实验目的与要求 1). 掌握碘蓝比色法测定稻米直链淀粉含量的操作方法与技能； 2). 熟悉整个实验操作环节与过程，并比较不同样品间的直链淀粉含量差异 3、操作步骤 1) 用精米样品，制备过100目（0.25mm）孔径的筛的米粉样品2-3g，称量0.1000g米粉，置于100ml容量瓶中； 2) 加入1.0ml 95%的乙醇，轻摇容量瓶，使样品湿润分散；再加入9.0ml 1N的氢氧化钠溶液，使碱液沿颈壁缓慢流下，旋转容量瓶，使碱液冲洗粘附于瓶壁上的样品； 3) 100 ℃ 水浴下15min-20min，冷却至室温，定容于50 ml 容量瓶； 4) 吸取2 ml， 放入另一个50 ml容量瓶中，加水至一半，再加1 ml 1N HAc, 使样品酸化，最后加2 ml碘试剂，定容，摇匀； 5) 静置20分钟后在620nm处比色，以空白溶液调零。 4、操作注意事项： 1)样品加到容量瓶的底部，不要撒在颈壁上； 2) 直链淀粉在溶于热水后，经缓慢冷却后容易发生凝沉现象，故测定时一定要使溶液混匀。 AC% 3.4 10.7 16.3 24.5 OD 0.118 0.273 0.357 0.603  4、实际操作步骤 用精米样品，制备过100目（0.25mm），称量10mg米粉，置于10ml离心管中； 加入0.9ml 1 M 的NaOH 30° 18h（目的是为了糊化），同步空白 沸水10min，定容到10ml 冷却至室温 离心 15分钟 取0.6ml上述溶液放入10ml容量瓶，加入0.12ml 1 M 乙酸 加入0.18ml 碘液（0.2%I:2%KI） ，加6.6ml水 静置20min，作空白调零。620nm测定OD。 5、操作注意事项： 1)样品加到容量瓶的底部，不要撒在颈壁上； 2) 直链淀粉在溶于热水后，经缓慢冷却后容易发生凝沉现象，故测定时一定要使溶液混匀。 AC% 3.4 10.7 16.3 24.5 OD 0.118 0.273 0.357 0.603  标准曲线：y=（53.78x-6.801）*100 （%） （吸光值范围0.3-0.5，直链淀粉的比例（11-24%） 实验2 稻米胶稠度测定 一．胶稠度的测定 一）原理 胶稠度是精米粉经碱解糊化后米胶冷却时的流动长度，它反映了米胶冷却后的延展性，即柔软性。其测定原理是比较不同样品的米胶在一定浓度下的米胶流动长度。分为软（≥61mm）、中（41-60mm）、硬（≤40mm）。其中 软胶米粉样的蒸煮食味品质好。 二)实验目的与要求 1. 掌握利用米胶延长法测定稻米胶稠度的原理与操作技能； 2. 比较A、B样品的胶稠度高低 三) 操作步骤 1) 样品的准备：将水稻样品加工成精米，并磨成粉，过100目筛，装在广口瓶中备用 2) 样品称量：待测样品在烘箱（60度下）中8小时，取出后冷却。称0.1000g样品，细心倒入试管底部。 3) 溶解样品和制胶：在试管中加入0.2ml 95%的乙醇（含0.025%的百里香草酚蓝），放在混合器上混合，使样品充分分散，再加入2.0ml 0.2 N KOH溶液，放在混合器上混合均匀（一定！），紧接着把试管放在沸水浴中，用玻璃弹球盖好试管，加热8-10min，取出试管，拿去玻璃弹球； 4) 静置5 min后，再将试管放在0度左右的冰水浴中冷却20min取出； 5) 静置试管并读数：将试管从冰浴中取出，立即放在铺有坐标纸、事先调好水平的水平台上，在室温（25度下）静置50分钟，测定米胶在试管内的流动长度（mm），双试验误差不超过7mm，取平均值。 四）、注意事项： 在加热过程，应控制试管内溶液保持试管高度的1/2-2/3左右，不要使溶液流出，同时保持各试管充分沸腾； 五）结果分析 胶稠度一般分三类，米胶长度在40mm以下者为硬胶，41-60 mm者为中胶，61 mm者为长胶。 类　　别 类 胶 长 度mm 硬胶稠度 ≤40 中胶稠度 41～60 软胶稠度 ≥61 1 000μg／mL清蛋白： y=137x-12.1 球蛋白： y=153x-9.11 醇溶蛋白：y=170.87x-6.18 谷蛋白： y=137x-12.1 Y(%)=y*n（稀释倍数）/ g